Question

【題目】某地盛產葡萄、柿子等水果，但因銷路不暢，造成水果嚴重積壓，腐爛變質。某駐村扶貧支教老師為解決葡萄、柿子等資源嚴重損耗問題，組織學生設計了如圖1所示裝置，試圖探究以柿子為原料制作柿子酒、柿子醋。請你冋答下列問題：

（1）酵母菌的分離和純化

①用淸水沖洗葡萄1—2遍除去污物，用榨汁機榨取葡萄汁后，將其裝入甲瓶中。葡萄汁的質量和環境溫度等方面滿足需求，在____________的發酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數其他微生物則被抑制。應注意的相關操作是____________。

②若要通過酵母菌的單菌落進行計數，應在培養液中加入____________，采用____________法分離和計數。能用這種培養基對酵母菌進行擴大培養嗎？____________。

（2）柿子酒、柿子醋的制備：

①若在甲瓶內裝入打碎的柿子漿，加入____________酶，能較好的提升柿子酒的清澈度。

②當酒精發酵基本完成時，將果汁的酒精濃度稀釋至5—6度，然后導入乙瓶（裝有5%—10%的醋酸菌液），攪勻，將溫度保持在30℃，進行醋酸靜置發酵。該過程中，對乙瓶應進行的操作是____________。

③為探究不同醋酸菌接種量（5%、10%、15%）與醋酸發酵的關系，進行了相應實驗，獲得圖2所示實驗數據。在接種后70h，接種量為15%的醋酸產量最少的主要原因是____________。

Answer 1

【答案】 缺氧、呈酸性 夾住a、b，關閉c、e，間隔一段時間應打開b處夾子排出CO2 瓊脂 稀釋涂布平板 不能 纖維素酶和果膠 打開夾子d，通入無菌的空氣 醋酸菌生長繁殖消耗營養物質較多，產生的代謝廢物積累太多

【解析】試題分析：利用酵母菌制作果酒的原理是在有氧環境中接種酵母菌，讓其進行有氧呼吸快速增殖；再在無氧環境中進行無氧呼吸，進行酒精發酵產生果酒。利用發酵產生的果酒繼續進行醋酸發酵的原理是在有氧環境中，接種醋酸菌，首先將乙醇轉變成乙醛，再進一步轉變成乙酸。

（1）①由于果酒發酵中，發酵液中缺氧且呈酸性，一定范圍內，酵母菌可以在這樣的發酵液中生長繁殖，而其他微生物受到抑制，從而發酵產生大量的果酒。如果將發酵液導入圖1的甲瓶中，應注意的操作是夾住a、b，關閉c、e，間隔一段時間應打開b處夾子，因為酵母菌發酵需要無氧環境，但會產生CO2，所以每發酵一段時間后，應打開b處夾子釋放CO2氣體，以防止發酵瓶因氣壓過大而爆裂。

②若要通過酵母菌的單菌落進行計數，需要用固體培養基培養才能形成菌落，所以應在培養液中加入凝固劑——瓊脂；分離并計數要采用稀釋涂布平板法接種培養；但不能用這種方法對酵母菌進行擴大培養，因為固體培養基不能被培養的酵母菌在短時間內充分利用。

（2）①發酵制作的果酒呈渾濁狀態，是因為發酵液中存在大量的酵母菌不能利用的纖維素和果膠，所以可以在發酵液中加入纖維素酶和果膠酶進行溶解，以提升柿子酒的清澈度。

②當酒精發酵基本完成時，將果汁酒倒入含有醋酸菌液的乙瓶進行醋酸發酵，由于醋酸發酵需要在有氧環境中進行，所以需要對乙瓶進行打開夾子d，通入無菌的空氣的操作。

③圖2是探究不同醋酸菌接種量（5%、10%、15%）與醋酸發酵的關系曲線。由于在等量果酒為原料的條件下，接種量越大的發酵瓶內發酵液消耗越快，同時產生的代謝廢物積累太多，所以在接種后70h，接種量最多的發酵瓶產生醋酸量最少。