Question

【題目】下圖1所示為動物細胞培養的基本過程示意圖。請據圖回答下列問題：

（1）容器A進行動物細胞培養時先要對材料剪碎，然后用__________________處理分散細胞，制成B瓶中的細胞懸液。細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養稱為______________，培養的細胞在貼壁生長到鋪滿培養瓶底部時停止分裂，這種現象稱為______________________。

（2）在D瓶中正常培養了一段時間后，發現細胞絕大部分死亡，只有極少數細胞存活，這是因為存活的細胞發生______________，可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為______代以內，以保持細胞正常的_________________核型。

（3）B、C、D瓶中的培養液為保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的_________。培養過程還需要提供O2和CO2等氣體環境，CO2的作用是__________________________________。

（4）動物細胞體外培養時，通常要在培養液中補充一定濃度的某些物質。如圖2是血清對正常細胞和癌細胞培養影響的實驗結果。據圖可知，培養______________細胞一定需要添加血清。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) 原代培養接觸抑制突變10二倍體抗生素調節pH正常

【解析】

據題文描述和圖示分析可知：該題考查學生對動物細胞培養等相關知識的識記和理解能力。

(1) 動物細胞培養時，將置于容器A中的動物組織剪碎后，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個細胞，再制成B瓶中的細胞懸液。細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養稱為原代培養。當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，此現象稱為細胞的接觸抑制。

(2) D瓶中進行的培養為傳代培養。一般來說，細胞在傳至10～50代左右時，增殖會逐漸減慢，以至于完全停止，這時絕大部分細胞死亡，只有極少數細胞發生突變，克服細胞壽命的自然極限，獲得不死性而得以存活。由于10代以內的細胞能夠保持正常的二倍體核型，所以目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內。

(3) B、C、D瓶中的培養液，為了保證無菌、無毒的環境，需要添加一定量的抗生素，以防止培養過程中的污染。培養過程還需要提供O2和CO2等氣體環境，其中CO2的作用是調節培養液的pH。

(4)圖2顯示：對于癌細胞而言，加入血清組與沒有加入血清組的細胞數目差異不顯著，說明是否加入血清對癌細胞的增殖影響不大；但對于正常細胞而言，加入血清組的細胞數目明顯高于沒有加入血清組的細胞數目，說明是否加入血清對正常細胞的增殖影響很大，所以培養正常細胞一定需要添加血清。