Question

【題目】某興趣小組進行探究“培養液中酵母菌種群數量與時間的變化關系”實驗，用血 細胞計數板計數酵母菌數量。血細胞計數板是一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻璃制品，樣品滴在計數室內。計數室由25個中格、每個中格由16個小格組成，每個汁數室容納 液體的總體積為0.1mm3。操作如下：

第一步：配制5%葡萄糖培養液500mL。

第二步：將500mL5%的葡萄糖培養液置于錐形瓶中，把0.lg活性千酵母加入5%葡萄糖溶液中，25℃下恒溫培養。

第三步：連續7天，每天隨機抽時間取樣，用血球計數板計數酵母菌數量，每次重復3次，求平均值，并做好記錄。

第四步：根據記錄的實驗結果，畫出酵母菌種群數量與時間的變化曲線。

回答下列問題：

（1）指出并改正實驗操作識驟第三步中的一處錯錯誤_______________。

（2）本實驗過粒中，封培養液中的酵母菌逐個計數是非常常困難的，可以采用___________法。

（3）從試管中吸出培養液迸行計數之前，需將試管輕輕振蕩幾次，以保證估算的準確性，減少誤差。如果取樣前沒有振蕩試管，直接取上層培養液，觀察得到的數據的誤差是___________（填“偏大”或“偏小”）。

（4）某同學第5d在使用血球計數板計數時做法如下：

①振蕩搖勻試管，取1mL培養液并稀釋100倍，稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺朌藍染液。

②先將蓋玻片放在計數室上，用吸管吸取稀釋后的培養液滴邊緣，讓培養液自行滲入，多余培養液滲入___________，制作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察并計數：在觀察汁數時只統計___________（填“被”或“不被”）染成藍色的酵母菌。如果一個小格內酵母菌過多，難以數清，則應當將樣液適當___________再計數。

④下圖1所示為視野內一個小格（“●”代表活的酵母菌），該小格中酵母菌數量為__________個。下圖2所示的a、h、c、d、e5個中格（80個小格）內若有活的酵母菌40個，則lmL酵母菌培養液樣品中菌體數最接近__________個。

（5）拫據每天測量的教據描繪出的酵母菌種群數量變化呈S型增長，培養后期菌群數量下降可能的原因是__________。

Answer 1

【答案】隨機抽時間取樣改為定時取樣； 抽樣檢測 偏小 （凹）槽內 不被 釋稀 6 2×106 營養物質逐漸被消耗、pH改變、有害物質的積累等

【解析】

本題考查了探究培養液中酵母菌種群數量的變化的實驗方面的相關知識，要求考生掌握調查的方式和實驗過程中的相關注意點；學會酵母菌計數的方法，并能利用公式對數量進行計算，難度適中．

（1）該實驗的自變量是時間，為了控制單一變量，應將隨機抽時間取樣改為定時取樣。

（2）培養液中酵母菌的數量比較多，逐個計數是非常困難的，通常采用抽樣檢測法進行計數是，使用血細胞計數板進行計數。

（3）從試管中吸出培養液進行計數之前，需將試管輕輕振蕩幾次，以保證估算的準確性，減少誤差。如果取樣前沒有振蕩試管，酵母菌細胞在底部，直接取上層培養液，觀察得到的數據的誤差是偏小。

（4）①振蕩搖勻試管，取1mL培養液并稀釋100倍，稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液。

②先將蓋玻片放在計數室上，用吸管吸取稀釋后的培養液滴于其邊緣，讓培養液自行滲入，否則計數偏大，多余培養液滲入(凹)槽內，作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察計數，由于臺盼藍可以將死的酵母菌染成藍色，死亡的細胞膜失去了選擇透過性，活的酵母菌仍為無色，因此在觀察計數時只統計不被染成藍色的酵母菌，如果一個小格內酵母菌過多，難以數清，則應當將樣液適當稀釋再計數。

④壓在方格線上的細胞只計相鄰兩邊及其夾角上的細胞數，壓在方格線上左線和上線及夾角的細胞數共3個，方格內細胞數是3個，因此該中格內酵母菌數量應計為6個。圖2所示的a、b、c、d、e5個中格(80個小格)內若有活的酵母菌40個，1mL=1cm3=1000mm3，1mL酵母菌培養液樣品中菌體數約為(1000mm3/0.1mm3)×25×(40/5)=2×106。

（5）根據每天測量的數據描繪出的酵母菌種群數量變化呈S型增長，培養后期由于營養物質被消耗、pH改變、有害物質的積累等原因導致菌群數量下降。