Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題。

（一）回答下列有關發酵食品生產工藝的問題：

（1）豆豉是大豆經過發酵制成的一種食品。影響豆豉風味的主要因素，除了菌種類型、發酵溫度、pH、氧氣等環境因素，還有________（答2個因素）。

（2）目前的豆豉發酵基本是一次性的，每次都經過“培養基滅菌→___→發酵→提取”，周而復始。能否________發酵、生產、提取是今后的發展方向。

（3）根據所學知識判斷，下面哪種微生物更適合用豆芽汁培養基培養_________

A醋桿菌B酵母菌C乳酸菌D農桿菌

（4）在果醋發酵工藝中，用谷殼糠等將醋桿菌固定化，裝在發酵瓶，下端直角玻璃管中塞____________用以過濾空氣；物料瓶內裝___________________，鋁箔封口。發酵過程若流速過快，則可能導致____________，為保障品質，需對發酵瓶流出液________________。

（二）為開發利用沿海灘涂鹽堿地，我國科學家應用基因工程培育出了耐鹽堿水稻新品系，大大提高了水稻等農作物的種植面積，增加了糧食產量。據此請回答下列問題：

（1）欲將耐鹽堿基因和Ti質粒進行重組形成重組質粒需要的工具酶有限制性核酸內切酶和____________，限制酶一般需要________種，這樣設計的目的是____________。

（2）將重組Ti質粒構建完成后導入農桿菌，經篩選后，對含目的基因的農桿菌進行大量繁殖，其目的是____________。

（3）取田間水稻的幼胚經消毒后接種到____________（固體、半固體、液體）培養基上誘導產生愈傷組織，利用含重組質粒的農桿菌侵染愈傷組織后，將其接種到MS生根培養基上，在該培養基中細胞分裂素具有解除高濃度生長素____________的作用。

（4）經組培獲得水稻試管苗后，提取其葉片組織中的DNA，采用PCR技術擴增目的基因，目的是為了____________。要檢測到轉基因水稻中目的基因的表達產物，一般采用的方法是_________。

Answer 1

【答案】大豆品種（原料）、發酵時間 接種 連續地 B 脫脂棉球 酒水混合物 發酵不充分 定期檢測/監控（答到一個詞給分） DNA連接酶 2 防止質粒和目的基因自身環化以及定向連接 獲取大量重組質粒（讓目的基因擴增 或克隆目的基因 ） 半固體 抑制根生長 檢測目的基因是否成功導入 抗原-抗體反應

【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；

（2）在無氧條件下，反應式如下：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養需氧型。果醋制作的原理：

當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。

3、基因工程的操作步驟：一是獲取目的基因；二是構建基因表達載體（核心）；三是將目的基因導入受體細胞（導入植物細胞一般有農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管道法等）；四是檢測和鑒定目的基因（一是檢測目的基因是否導入成功，二是檢測目的基因是否成功表達，三是檢測目的基因控制的性狀是否在能在植株上表現出來）。

（一）（1）影響豆豉風味的因素很多，包括菌種類型、發酵溫度、pH、氧氣等環境因素還有發酵的大豆品種原料和發酵時間。

（2）發酵過程利用了微生物的代謝，因此培養過程要經過“培養基滅菌→接種→發酵→提取”。這種發酵技術基本上是一次性的，因此如何連續性低發酵、生產、提取是今后的發展方向。

（3）豆芽汁培養基適合培養真菌，選項中只有酵母菌屬于真菌，故選B。

（4）醋酸菌是好氧細菌，下端直角玻璃管中塞脫脂棉球用以過濾空氣。物料瓶內裝酒水混合物，鋁箔封口。發酵過程若流速過快，則可能導致發酵不充分，為保障品質，需對發酵瓶流出液進行定期檢測。

（二）（1）重組質粒構建過程中，用的工具酶包括限制性核酸內切酶和DNA連接酶，其中限制性核酸內切酶一般用兩種，這樣防止目的基因和質粒發生自身環化以及定向連接。

（2）為了獲取大量重組質粒，可對含目的基因的農桿菌進行大量繁殖。

（3）愈傷組織的培養采用的是半固體培養基。生長素具有兩重性，低濃度促進生長，高濃度抑制生長，在MS生根培養基上，細胞分裂素具有解除高濃度生長素抑制生根的作用。

（4）提取葉片組織的DNA，采用PCR技術擴增目的基因，鑒定目的基因是否成功導入。對于檢測轉基因水稻中目的基因是否表達，可采用抗原-抗體雜交方法。