Question

【題目】為探究“某品牌酸奶中乳酸菌數量及其對抗生素耐藥性情況”，某同學進行了如下實驗：請分析回答下列問題：

⑴配制的乳酸菌培養基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養成分外，還應加入適量的______和瓊脂。在培養基各成分溶化與滅菌之間，要進行的操作是_____________。

⑵接種微生物的方法有很多，圖1中過程③所示的方法為________。用該方法統計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養皿，原因是_________________ 。用該方法統計樣本菌落數后，所得數據需要乘以10n后，才可表示酸奶樣品中的乳酸菌的數量(單位：個/ml)，這里的n=_______。

⑶請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環素耐藥性”的實驗操作步驟：

步驟1:分別取______________加入三組無菌培養皿中，再加入滅菌并冷卻到________℃左右的培養基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2:向三組培養基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。

步驟3:將接種后的三組培養基和一個________都置于適宜溫度等條件下培養一定時間，觀察比較培養基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】（1）維生素 調pH

（2）稀釋涂布平板法 分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠 6

（3）等量的且適量的青霉素、四環素、無菌水 50（1分） 未接種的培養基

【解析】（1）配制的乳酸菌的培養基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養成分外，還應加人適量的維生素和瓊脂。培養基的制作過程是：計算-稱量-溶化-滅菌-倒平板。在溶化和滅菌之間要進行調pH的操作。

（2）圖1過程①②是梯度稀釋，過程③是涂布平板，故過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養皿，原因是分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠。由圖可知，該樣品是10mL，然后經過①過程稀釋了100倍，又經過三次②過程繼續稀釋了三次10倍，總共被稀釋了100000倍，故最后計算該樣本菌落數后，需要×100000倍×10mL=106，所以 n=6。

（3）由“檢測乳酸菌對青霉素、四環素耐藥性”這一實驗目的可知，該實驗的自變量是青霉素、四環素，所以在無菌培養皿中分別加入等量且適宜的青霉素、四環素和無菌水，其中無菌水這一組是對照組。倒平板的溫度是50°C左右。因需要檢驗培養基滅菌是否徹底，所以需要將一個未接種的培養基和上述的三組培養基同時置于適宜溫度下培養。