Question

【題目】為了解基因結構，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術將單酶水解片段分離，計算相對大�。蝗缓笤儆昧硪环N酶對單酶水解片段進行降解，分析片斷大小。下表是某小組進行的相關實驗。

（1）由實驗可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為______個和_____個。

（2）根據表中數據，請在下圖中標出相應限制性酶的酶切位點并注明相關片斷的大小。_________________

（3）BamH Ⅰ與BglⅡ的識別序列及切割位點如下圖，用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數個BamHⅠ和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作，若干循環后_______序列明顯增多。

（4）用于基因治療的基因種類有：______________、_____________、_____________。

Answer 1

【答案】 3 2 GGATCT//CCTAGA 從健康人體上分離得到的功能正常的基因 反義基因 自殺基因（或編碼可以殺死癌變細胞的蛋白酶基因）

【解析】

限制性核酸內切酶是可以識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶，簡稱限制酶。根據表格數據分析，已知一線性DNA序列共有2100+1400+1000+500=5000bp，其經A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4個片段，說明酶A有3個切割位點；再經B酶切割后，2100bp被切割成了1900bp和200bp，1400bp被切割成了800bp和600bp，1000bp和500bp沒有被切割，說明酶B有2個切割位點；同樣的道理，線性DNA經B酶切割后形成2500bp、1300bp、1200bp共3個片段，說明酶B有2個切割位點；再經A酶切割后，2500bp被切割成了1900bp和600bp，1300bp被切割成了800bp和500bp，1200bp被切割成1000bp和200bp，說明酶A有3個切割位點。

（1）根據以上分析已知，A酶的識別序列和切割位點為3個，酶B的識別序列和切割位點為2個。

（2）根據以上分析已知，A酶切割后的片段為2100bp、1400bp、1000bp、500bp，再經過B酶后將其中的2100bp切割成了1900bp和200bp，1400bp切割成了800bp和600bp；而B酶第一步水解的產物是2500bp、1300bp、1200bp，再經過A酶后將其中的2500bp切割成了1900bp和600bp，1300bp切割成了800bp和500bp，1200bp切割成1000bp和200bp，因此兩者酶的切割位點如圖所示：

。

（3）據圖分析，兩種限制酶切割后漏出來的堿基序列都是-GATC-，可以發生堿基互補配對形成或，因此若干循環后該序列明顯增多。

（4）用于基因治療的基因種類有：從健康人體上分離得到的功能正常的基因、反義基因、自殺基因（或編碼可以殺死癌變細胞的蛋白酶基因）。