Question

【題目】在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉基因水稻已經悄然收獲。這種轉基因大米可以幫助人們補充每天必需的維生素A。由于含有可以生成維生素A的β胡蘿卜素，它呈現金黃色澤，故稱“金色大米”。“金色大米”的培育流程如圖所示，請回答下列問題。（已知酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—）。

（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是__________，通過該操作形成了圖中的__________（填字母），它的構成至少包括__________等。

（2）在研究過程中獲取了目的基因后采用__________技術進行擴增。在構建c的過程中目的基因用__________（填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）進行了切割。檢驗重組載體導入能否成功，需要利用___________作為標記基因。

（3）過程d采用__________法，過程e運用了__________技術，在該技術應用的過程中，關鍵步驟是利用含有一定營養和激素的培養基誘導植物細胞進行__________和_________。

Answer 1

【答案】(1)基因表達載體的構建 c 目的基因、啟動子、終止子、標記基因（2分）

(2)PCR 限制酶Ⅱ 基因I

(3)農桿菌轉化 植物組織培養 脫分化 再分化

【解析】（1）基因工程操作四步曲中的核心步驟是基因表達載體的構建，構成的c為基因表達載體（或重組質粒，重組DNA分子），它的構成除了復制原點、目的基因外，還必須有啟動子、終止子、標記基因等。

（2）在研究過程中獲取了目的基因后采用PCR技術進行擴增．據圖分析，目的基因的兩側有-GGATCC-、-GATC-兩種序列，由于酶I的識別序列和切點是一G↓GATCC一酶II的識別序列和切點是一↓GATC-，因此只能選擇限制酶Ⅱ獲取目的基因．圖中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此檢驗重組載體導入能否成功，需要利用基因I作為標記基因。

（3）由于水稻屬于單子葉植物，常采用農桿菌轉化；過程e將水稻細胞培養成完整植株運用了細胞工程中的植物組織培養技術，該技術的理論依據是植物細胞的全能性；在該技術應用的過程中，關鍵步驟是利用含有一定營養和激素的培養基誘導植物細胞進行脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植株。