Question

【題目】重組人纖溶酶原激活劑（rhPA)是臨床血栓疾病治療的主要生物藥品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多發情，產仔率高等優點，可以作為乳腺生物反應器批量生產藥物。下圖是利用轉基因兔生產重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)的過程，請據圖回答。

（1）構建rhPA基因表達載體需要用限制酶_________切割質粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達載體需用_____________酶切割重組質粒使之線性化。

（2）對母兔注射_________使其超速排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達載體導人家兔受精卵中最有效的導入技術是____________。

（3）將受精卵置于37℃的_______________氣體環境中培養一段時間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經___________處理。

（4）子代兔需要經過篩選過程才能獲得生產人組織纖溶酶原激活劑的生物反應器，原因有____________、____________。

Answer 1

【答案】 XhoⅠ SalⅠ和NotⅠ 促性腺激素 顯微注射技術 95%空氣和5%C02 同期發情（孕激素） 只有部分子代兔導入了人組織纖溶酶原激活劑基因 公兔不能表達人組織纖溶酶原激活劑

【解析】試題分析：熟記并理解基因工程的基本操作程序及其應用、胚胎移植、動物細胞培養等相關的基礎知識、形成清晰的知識網絡。在此基礎上，結合問題情境，從題圖和題意中提取有效信息進行相關問題的解答。

(1)分析圖示可知：構建rhPA基因表達載體時，目的基因（rhPA基因）插入到了質粒上的XhoⅠ酶切位點的下方，說明是用限制酶XhoⅠ切割的質粒和目的基因的。依據乳腺特異性表達載體的組成可知：為獲得乳腺特異性表達載體，使重組質粒線性化，需用SalⅠ和NotⅠ酶進行切割。

(2)對母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達載體導入家兔受精卵中，常采用的最有效的導入技術是顯微注射技術。

(3) 將受精卵置于37℃的95%空氣和5%C02氣體環境中培養一段時間后，移植到經同期發情（孕激素）處理的代孕兔的輸卵管中，以使該受精卵繼續發育為子代。

(4)由于只有部分子代兔導入了人組織纖溶酶原激活劑基因，而且公兔不能表達人組織纖溶酶原激活劑，所以子代兔需要經過篩選過程才能獲得生產人組織纖溶酶原激活劑的生物反應器。