Question

【題目】埃博拉出血熱是由埃博拉病毒引起的一種烈性傳染病，死亡率在50％至90％之間。致死原因主要為中風、心肌梗塞、低血容量休克或多發性器官衰竭。下圖是制備埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白的過程。請據圖回答：

(1)埃博拉病毒是單鏈RNA病毒，可利用_____________法得到含(EBOV)VP40基因的DNA。過程①利用PCR技術擴增該DNA片段的前提是，要有一段_____________以便合成引物，該技術用到的酶是_________。

(2)過程②需要用到的工具酶是___________，一個完整的基因表達載體必須要有標記基因，標記基因的作用是__________。

(3)科學家制備(EBOV)VP40蛋白的目的是利用此蛋白進一步獲取_________用于治療埃博拉出血熱。

(4)過程③中，選用大腸桿菌作為受體細胞的優點有_____________(答出3點即可)。

Answer 1

【答案】反轉錄（逆轉錄） 已知目的基因的核苷酸序列 Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶） 限制酶（限制性核酸內切酶）、DNA連接酶 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來 單克隆抗體（抗體） 繁殖快、單細胞、遺傳物質少、易培養

【解析】

基因工程的基本工具有：限制酶、DNA連接酶和載體。質粒DNA分子上有一個至多個限制酶切割位點，供外源DNA片段的質粒進入受體細胞后，停留在細胞中進行自我復制，或整合到染色體DNA上，隨染色體DNA進行同步復制。質粒DNA分子上有特殊的遺傳標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。利用PCR技術獲取目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物。

(1)據分析可知，埃博拉病毒是單鏈RNA病毒，可利用逆轉錄法得到含(EBOV)VP40基因的DNA。過程①利用PCR技術擴增該DNA片段的前提是，要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物，該技術用到的酶是Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）。

(2)據分析可知，過程②需要用到的工具酶是限制酶（限制性核酸內切酶）、DNA連接酶，一個完整的基因表達載體必須要有標記基因，標記基因的作用是：鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

(3)埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白相當于抗原，科學家制備(EBOV)VP40蛋白的目的是利用此蛋白進一步獲取單克隆抗體（抗體）用于治療埃博拉出血熱。

(4)據分析可知，過程③中，選用大腸桿菌作為受體細胞的優點有繁殖快、單細胞、遺傳物質少、易培養。