Question

【題目】富集培養是從微生物混合群開始，對特定種的數量比例不斷增高而引向純培養的一種培養方法。從自然菌樣篩選較理想生產菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養→純種分離→性能測定。聯苯降解菌內的聯苯水解酶是催化多聚聯苯（環境污染物）降解的關鍵酶，下圖示意用富集方法從土壤中分離聯苯降解菌的過程。請分析回答：

（1）①②③過程目的是___________________________。

（2）進行⑤過程的目的是_________________，可采用____________法將初篩菌液接種在固體培養基上。在⑤過程中，首先要對培養基和培養皿要進行高壓蒸汽滅菌，目的是________________________________________。

（3）在⑥和⑦的實驗檢測過程中，作為對照組的是________________組，設置實驗組的目是_________________________________________________________________ 。

（4）若用此方法從土壤中分離自生固氮菌，菌落在平板上培養時間不宜過長的原因是__________________________。配置的培養基中所需的營養物質有____________

A、碳源 B、氮源 C、生長因子 D、水分 E、無機鹽

（5）某同學在做微生物實驗時，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，請你寫出分離得到純度較高的自生固氮菌和酵母菌的實驗原理__________________________。

Answer 1

【答案】通過富集培養，增大聯苯降解菌（目的菌）的濃度（比例） 獲得聯苯降解菌的單個菌落（進一步分離純化目的菌） 稀釋涂布法 殺滅細菌和芽孢，防止雜菌干擾實驗結果 ⑦ 說明獲得的單菌落中沒有其它雜菌 自生固氮菌會分泌含氮化合物，引起雜菌生長 A（C）DE 自生固氮菌能在無氮培養基上生長繁殖，而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖

【解析】

（1）微生物培養的程序：a．器具的滅菌、b．培養基的配制、c．培養基的滅菌、倒平板、d．微生物接種、e．恒溫箱中培養、f．菌種的保存；在培養的過程中一定要注意無菌操作。
（2）選擇培養基：選擇培養基是根據不同微生物在代謝過程中所需要的營養物質和環境不同而配制的。不同微生物對某些化學藥品的抵抗力不同，利用這些特點，我們便可配制出適于某些微生物生長而抑制其他微生物的選擇培養基，例如從土壤中分離放線菌時，可在培養基中加入10%的酚數滴，抑制細菌和真菌的生長；根據對營養物質的特殊的需求，可以選擇不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素。

（1）①②③過程目的是通過富集培養，增大聯苯降解菌（目的菌）的濃度（比例）。
（2）進行⑤過程的目的是獲得聯苯降解菌的單個菌落（進一步分離純化目的菌），可采用稀釋涂布法法將初篩菌液接種在固體培養基上；在⑤過程中，首先要對培養基和培養皿要進行高壓蒸汽滅菌，目的是殺滅細菌和芽孢，防止雜菌干擾實驗結果。
（3）在⑥和⑦的實驗檢測過程中，⑦作為實驗的對照組，實驗組⑥能夠說明獲得的單菌落中沒有其它雜菌。
（4）由于自生固氮菌會分泌含氮化合物，引起雜菌生長，因此用此方法從土壤中分離自生固氮菌，菌落在平板上培養時間不宜過長．由于自身固氮菌能夠固定空氣的氮元素，因此在培養基中不加氮源可以起到選擇作用，但是碳源、生長因子、水分和無機鹽等仍然是必須的成分。
（5）自生固氮菌能在無氮培養基上生長繁殖，而酵母菌則不能，因此可以用無氮培養基篩選出自身固氮菌；而青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖，因此在含有青霉素的培養基中可以篩選出酵母菌。