Question

已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

（1）實驗步驟①所代表的反應過程是_______________
（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用______________、________________
（3）如果省略步驟②而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進行________，也不能進行______________。
（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特征，可用_______________與______________________進行抗原—抗體特異性反應實驗，從而得出結論。
(5)步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是_______________________________。

Answer 1

（16分，每格2分）
答案　(1)逆轉錄　(2)限制性核酸內切酶和DNA連接酶　(3)復制　以其為模板合成S基因的mRNA(或轉錄)(4)大腸桿菌中表達的S蛋白　SARS康復病人血清　(5)相同　表達蛋白質所用的基因相同

解析試題分析：本題考查基因工程的相關知識。
（1）實驗步驟①RNA控制DNA合成，該過程是逆轉錄。
（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B，必須使用同種限制性核酸內切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA。
（3）如果省略步驟②基因表達載體的構建，而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進行復制，也不能進行以其為模板合成S基因的mRNA(或轉錄)。
（4）步驟④檢測所表達的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清進行抗原—抗體特異性反應實驗，如果能夠特異性的結合，說明表達成功。
(5)步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達蛋白質所用的目的基因相同。
考點：基因工程的步驟。
點評：本題有一定的綜合性，意在考查學生識記和理解能力。