Question

【題目】陳皮是一味傳統的中草藥，研究者從陳皮中分離出有益微生物，制成微生物制劑再應用于陳皮的生產，有助于陳皮的防腐與風味的維持．具體操作如圖，其中①～④表示過程．

研究者從陳皮中共分離純化得到23株菌株，分別標為cp01﹣cp23，但沒有分離純化得到真菌．提取該23株菌株DNA，經過PCR技術擴增后電泳（DNA在一定的電場力作用下，在凝膠中向正極泳動，DNA分子越大，泳動越慢），所得電泳圖譜如圖，其中M表示已知不同分子量的DNA，比照其大小可以粗略估算樣品DNA分子量的大小．

（1）如上圖中過程③所用的接種方法是 ， 過程④的目的是 ， 所用的接種方法是 ． 整個操作過程均為無菌操作，所使用的器皿均滅過菌，其目的是 ．
（2）據題意分析，圖中的電泳方向是（由上至下/由下至上），圖中用圓圈標出的DNA其分子量大小范圍在bp之間．
（3）已知同一類群的菌株電泳后DNA圖譜一致，據圖分析，該23株菌株共分個類群．其中，與cp12屬于同一類群的有 ．
（4）陳皮樣品中沒有分離到真菌，可能的原因是（ ）（多選）
A.陳皮的處理對真菌有抑制作用
B.該陳皮樣品中可能沒有真菌
C.陳皮能夠抑制多種真菌的生長
D.陳皮中的細菌對真菌有抑制作用
E.陳皮樣品無法為真菌提供碳源

Answer 1

【答案】
（1）稀釋涂布法；分離純化；平板劃線法；殺死微生物及芽孢
（2）由上至下；500～750
（3）4；cp18，cp19，cp23
（4）ABCD
【解析】解：（1）據圖分析，過程③培養達到的菌落均勻，所用的接種方法是稀釋涂布平板法，過程④是平板劃線法，目的是分離純化．無菌操作過程中的滅菌目的是殺死微生物細胞、孢子及芽孢．（2）依據題意和題圖，電泳方向是由上至下．圖中用圓圈標出的DNA其分子量大小范圍對應在500～750bp之間．（3）由于同一類群的菌株電泳后DNA圖譜一致，據圖分析，該23株菌株共分4個類群．cp12、cp18、cp19、cp23的DNA的分子量大致相同，應該屬于同一類群．（4）陳皮樣品中沒有分離到真菌，可能的原因有陳皮的處理對真菌有抑制作用、該陳皮樣品中可能沒有真菌、陳皮能夠抑制多種真菌的生長或陳皮中的細菌對真菌有抑制作用．故選：ABCD．
所以答案是：（1）稀釋涂布法 分離純化 平板劃線法 殺死微生物及芽孢（2）由上至下 500～750（3）4 cp18，cp19，cp23（4）ABCD