Question

【題目】生活飲用水的微生物安全性日常檢測是非常重要的。請回答下列問題：

（1）將己知體積的飲用水用____________過濾后，將其放在含有____________培養基上培養，根據培養基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數目。

（2）為了探究溫度對大腸桿菌種群數量的影響。將適量大腸桿菌菌液與適量的無菌葡萄糖溶液混合均勻，取等量取適量接種到若干培養瓶中，隨機均分成幾組，并編號，現在在顯微鏡下用血細胞計數板進行計數，并記錄，再將各組分別置于不同溫度的環境中培養兩周，每天同一時間取樣技計數，并記錄。統計分析實驗所得數據。

①請預期實驗結果（設計一個坐標系，分別畫出大腸桿菌在最適溫度及高于、低于最適溫度時的種群數量變化趨勢曲線）

②在整個實驗過程中，從靜置培養瓶中取培養樣液計數時應注意______________________。培養后期樣液需用____________稀釋后再計數。將樣液稀釋103倍，采用血細胞計數板計數 （計數室規格為2mm×2mm×0.1mm，共25個中格），所觀察到的計數室中大腸桿菌分布如下圖。若只以圖中5個中格的統計為例，則培養液中大腸桿菌數為____________個/mL。

Answer 1

【答案】 濾膜 伊紅美藍 不同溫度下大腸桿菌種群數量隨時間變化的趨勢圖 搖勻培養液后再取樣 無菌水 2.5×108

【解析】試題分析：酵母菌可以用液體培養基來培養，培養液中的酵母菌種群的增長情況與培養液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關，可以根據培養液中的酵母菌數量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數量的變化情況；利用血球計數板在顯微鏡下直接計數是一種常用的細胞計數法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數目，所以一般用于單細胞微生物數量的測定；探究酵母菌種群數量的變化實驗中，實驗流程為：①酵母菌培養（液體培養基，無菌條件），②振蕩培養基（酵母菌均勻分布于培養基中），滴加培養液時，應先加蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養液，③觀察并計數→重復②、③步驟（每天計數酵母菌數量的時間要固定），④繪圖分析。

（1）伊紅-美藍培養基常用來鑒別大腸桿菌，其原理是大腸桿菌能分解乳糖產生大量的混合酸，菌體帶H+故菌落被染成深紫色（黑色），從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。因此將己知體積的飲用水用濾膜過濾后，將其放在含有伊紅美藍培養基上培養，進而鑒定和計算大腸桿菌的存在和數目。

（2）實驗的自變量是時間和溫度，因變量是大腸桿菌種群數量，因此橫坐標是時間，縱坐標是種群數量，不同的溫度用不同的曲線表示，溫度高于或等于最適宜溫度，種群數量增加都會變慢，如圖：

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（3）靜置培養瓶中大腸桿菌分布不均勻，因此從靜置培養瓶中取培養樣液計數時應注意搖勻培養液后再取樣；培養后期大腸桿菌數量過高，不利于計數，因此應該用無菌水稀釋后再計數；據圖分析，5個中格中大腸桿菌的平均數為4個，則25個中格中的大腸桿菌共100個，因此培養液中大腸桿菌數=100÷（2×2×0.1×10-3）×103=2.5×108個/mL。