Question

【題目】如圖1所示是將人的生長激素基因導入細菌D細胞內，產生“工程菌”示意圖．所用的運載體為質粒A，生長素合成基因為B，a為目的基因于質粒A的結合部位．（已知細菌D細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌后，基因能得到表達）

（1）圖1中A和B產生的C叫_____，它通過在體外完成，此過程必須用到的工具酶為DNA限制性核酸內切酶和_____．除了細菌以外，理論上能夠接納C的受體細胞還可以是_____。

（2）若質粒A模板鏈中的AGT序列對應一個密碼子，翻譯時識別該密碼子的tRNA上相應的堿基序列是_____．一般而言，一個核糖體最多可同時容納_____分子的tRNA。

（3）限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點分別是﹣C↓AATTG﹣和﹣G↓AATTC﹣．如圖表示四種質粒和目的基因，其中，箭頭所指部位為限制酶的識別位點，質粒的陰影部分表示標記基因．不適合作為如圖2所示的目的基因載體的質粒是[_____]。

（4）如圖3所示能正確反映目的基因轉錄產物內部結構的是_____。

TSS：轉錄起始位點，TTS：轉錄終止位點，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子。

Answer 1

【答案】重組質粒 DNA連接酶 酵母菌等 AGU 2（或3） BCD B

【解析】

分析圖1：圖1表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶。
分析圖2：圖2中，限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點分別是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-。
分析圖3：TSS：轉錄起始位點，TTS：轉錄終止位點，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子。

（1）圖1表示基因表達載體的構建過程，其中A（質粒）和B重組產生的C叫重組質粒；該過程需要先用限制性核酸內切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質粒．除了細菌以外，酵母菌等也能夠作為接納C的受體細胞。
（2）質粒A模板鏈中堿基為AGT，則mRNA中對應的密碼子為UCA，tRNA上中的反密碼子為AGU．在翻譯的過程中，一個核糖體一般可以容納兩個tRNA攜帶氨基酸進入核糖體與mRNA進行互補配對，使得兩個氨基酸之間脫水縮合形成肽鍵，最多不會超過2（或3）個。
（3）A、A中含有標記基因，且限制酶切割后不會破壞標記基因，A正確；
B、B中不含標記基因，不便于之后的篩選過程，B錯誤；
C、C中含有標記基因，但用限制酶切割后會破壞標記基因，C錯誤；
D、D中含有標記基因，但用限制酶切割后會破壞標記基因，D錯誤。
故選BCD。
（4）基因轉錄產物為mRNA，因此轉錄起始位點（TSS）和終止位點（TTS）應在mRNA兩端；作為起始密碼子（STC）應在轉錄起始位點之后，終止密碼子（SPC）應在轉錄終止位點之前，這樣才能保證翻譯的正常開始和終止。
故選B。