Question

【題目】【生物選修1-生物技術實踐】多氯聯苯是一種對人體有很大危害的有機物質，呈油狀液體，污染土壤后，很難清除。研究發現部分酵母菌具有分解多氯聯苯的作用，為消除這種污染，科研人員計劃從受污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯苯的菌株。

（1）培養基中加入多氯聯苯作為______________，從功能上講該培養基屬于_____________。

（2）上述培養基的滅菌方法是______________；篩選分解多氯聯苯的菌株時，應將土壤樣品________。

（3）對初步提取到的菌株要進行_______________，一般操作方法有兩種，下圖是________法。

（4）將酵母菌溶液分別稀釋10、100、1000倍，每個濃度都接種3個平板，每個平板均接入0.1ml稀釋液。經適當培養后，平板上的菌落數如下表所示：

據此可得出每升溶液中酵母菌活菌數為_________個/L。

Answer 1

【答案】 唯一碳源 選擇培養基 高壓蒸汽滅菌法 稀釋（溶解） 純化 稀釋涂布平板法 4.6×107

【解析】（1）為了從土壤中分離篩選能分解多氯聯苯的酵母菌，需要用只含多氯聯苯作為唯一碳源的培養基，以保留能分解利用多氯聯苯的酵母菌，而淘汰不能利用多氯聯苯的微生物。

（2）對培養基滅菌最好用高壓蒸汽滅菌法滅菌。篩選分解多氯聯苯的菌株時，應將土壤樣品稀釋后再接種到選擇培養基上。

（3）由于初步提取到的菌株中可能含有大量的雜菌，所以要進行純化培養，一般操作方法有兩種，一種是稀釋涂布平板法，一種是平板劃線法。題中圖示為稀釋涂布平板法。

（4）活菌計數法的原理是當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數,就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了增強實驗的說服力與準確性，同時為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。所以根據表中統計的菌落數，只有稀釋100倍的統計結果符合要求，計算1L培養液中酵母菌數為（47+50+41）÷3÷0.1×100×1000個=4.6×107個。