Question

【題目】基因工程

為擴大可耕地面積，增加糧食產量，沿海灘涂鹽堿地的開發利用備受關注。我國科學家應用耐鹽堿基因培育出了耐鹽堿水稻新品系，為解決我國的糧食問題做出了重要貢獻。

幾種限制酶識別序列及切割位點表

限制酶	AluⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	SmaⅠ
切割位點

【1】圖中過程①是基因工程的______步驟，除了圖示方法外，還可以用______方法達成同一目的。

【2】過程②采用PCR技術是為了實現基因的擴增，該過程需要用到的原料主要是______。

【3】如果要將耐鹽堿基因和質粒重組，應該在圖中兩側的A和B位置接上______限制酶識別序列。如果從連接效率更高的角度，最好選擇____________________

A．EcoRⅠ和EcoRⅠ
B．PstⅠ和SmaⅠ
C．EcoRⅠ和PstⅠ
D．EcoRⅠ和SmaⅠ

【4】從基因工程的分類上，圖示的基因工程屬于______基因工程。

【5】耐鹽堿基因成功導入了水稻細胞中，是否一定意味著該基因工程取得了成功？______，如果是請分析原因，如果否請提出一個從個體水平檢測該基因工程是否成功的方案。______。

Answer 1

【答案】

【1】 獲取目的基因 從生物體細胞中分離（限制酶切）

【2】4種脫氧核苷酸

【3】 ABCD C

【4】植物

【5】 不一定 將植物種植在鹽堿地中，觀察其是否能正常生長

【解析】

分析題圖：圖示表示應用耐鹽堿基因培育出了耐鹽堿水稻新品系的過程，其中①表示以mRNA為模板逆轉錄形成DNA；②表示采用PCR技術擴增目的基因；④表示基因表達載體的構建過程；⑤表示將目的基因導入大腸桿菌，使其大量繁殖；⑥⑦表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞。

【1】圖中①表示獲取目的基因；該步驟中，除了圖示方法外，還可以從生物體細胞中分離（限制酶切）獲得目的基因。

【2】過程②擴增目的基因需要的原料是4種游離的脫氧核糖核苷酸。

【3】圖中質粒上含有限制酶EcoRⅠ、PstⅠ和SmaⅠ的識別序列和切割位點，且限制酶EcoRⅠ的切割位點有兩個，因此如果要將耐鹽堿基因和質粒重組，應該在圖中兩側的A和B位置接上限制酶EcoRⅠ和EcoRⅠ或PstⅠ和SmaⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ或EcoRⅠ和SmaⅠ的識別序列。連接限制酶EcoRⅠ和EcoRⅠ可能會導致反向連接或自身環化；連接限制酶PstⅠ和SmaⅠ或連接限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ，由于存在平口末端，而DNA連接酶連接平口末端時效率比較低。故選C。

【4】從基因工程的分類上，圖示的基因工程屬于植物基因工程。

【5】耐鹽堿基因成功導入后不一定能表達，因此目的基因成功導入了水稻細胞中，不一定意味著該基因工程取得了成功；從個體水平檢測該基因工程是否成功的方案：將植物種植在鹽堿地中，觀察其是否能正常生長。

本題結合耐鹽堿水稻新品系的培育過程圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，能準確判斷圖中各過程的含義，再結合圖中信息準確答題。