Question

【題目】下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，下圖甲是某種基因表達載體及限制酶切割位點示意圖，圖乙是利用圖甲所示的基因表達載體獲得的含目的基因的表達載體。請回答下列有關問題：

（1）基因工程操作過程中，能作為載體的除質粒外，還包括_____________。質粒作為基因工程的載體，應具備的基本條件有________________________________________________（答兩點）。

（2）某DNA片段經BamHⅠ酶切割得到的目的基因，能與圖甲基因表達載體被__________（填“EcoRⅠ”或“Sau3AⅠ”）酶切割后的產物連接，原因是____________________________________________________。

（3）構建基因表達載體，需要限制酶和_____________等工具酶。圖乙所示的表達載體能否在宿主細胞中表達目的基因產物，并說明原因。____________________________________________________。

Answer 1

【答案】 噬菌體的衍生物、動植物病毒 能夠自我復制、具有標記基因、具有一個或多個限制酶切割位點 Sau3AⅠ 這兩種酶切割后產生的DNA片段具有相同的黏性末端 DNA連接酶 不能；圖乙中目的基因插入在啟動子的上游，目的基因不能轉錄

【解析】試題分析：本題考查基因工程，考查對基因工程工具和基因表達載體的理解和識記。解答此類題目，應觀察、判斷限制酶的識別序列，明確基因表達載體的四部分構成。

（1）基因工程操作過程中，能作為載體的除質粒外，還包括噬菌體的衍生物、動植物病毒。質粒作為基因工程的載體，應能夠自我復制，使目的基因在受體細胞內穩定保存；具有標記基因，以便于目的基因的檢測與鑒定；具有一個或多個限制酶切割位點，以便插入目的基因。

（2）BamHⅠ和Sau3AⅠ切割DNA后得到相同的黏性末端，可以通過堿基互補配對連接。

（3）構建基因表達載體，需要限制酶和DNA連接酶等工具酶。圖乙中目的基因插入在啟動子的上游，目的基因不能轉錄，不能在宿主細胞中表達目的基因產物。