Question

【題目】草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成，最終導(dǎo)致植物死亡。但是，它的使用有時(shí)也會(huì)影響到農(nóng)作物的正常生長(zhǎng)。目前，已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物植物細(xì)胞內(nèi)，從而獲得的轉(zhuǎn)基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。

（1）下圖A-F表示6株植物，其中，植物A和D對(duì)草甘膦敏感，B和E對(duì)草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過(guò)了轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功還未知。若ABC澆清水，DEF澆的水中含有草甘膦，上述DEF植物中，肯定能健康成長(zhǎng)的是 。

（2）限制酶是基因工程必需的工具酶，其作用是。

（3）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有 種DNA片段。

（4）假設(shè)圖1中質(zhì)粒原來(lái)BamHⅠ識(shí)別位點(diǎn)的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶BclⅠ的堿基序列，現(xiàn)用BclⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒，則該圖1中①的DNA右側(cè)還能選擇BamHⅠ進(jìn)行切割，并能獲得所需重組質(zhì)粒嗎？ 請(qǐng)說(shuō)明理由 。

（5）若上述假設(shè)成立，并成功形成重組質(zhì)粒，則重組質(zhì)粒（ ）

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切開(kāi)

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切開(kāi)

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切開(kāi)

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切開(kāi)

（6）圖2中不同組織細(xì)胞的相同DNA進(jìn)行過(guò)程③時(shí)啟用的起始點(diǎn) （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中選擇），其原因是 。

（7）要想檢測(cè)導(dǎo)入的EPSPS基因是否表達(dá)，在分子水平上可用 方法進(jìn)行檢測(cè)。

Answer 1

【答案】（1）E

（2）能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)

（3）4 （4）能 切割后露出的黏性末端相同

（5）D

（6）不完全相同 不同組織細(xì)胞中基因會(huì)進(jìn)行選擇性表達(dá)

（7）抗原-抗體雜交

【解析】

試題分析：（1）在DEF中因?yàn)镋具有草甘膦抗性所以肯定能存活，而D敏感不能成活，F(xiàn)是否轉(zhuǎn)入成功不知道，所以不一定能成活。

（2）限制酶的作用是能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。

（3）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質(zhì)粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應(yīng)管中有4種DNA片段。

（4）由圖可知限制酶BamHⅠ和BclⅠ切割后的黏性末端相同，所以當(dāng)用BclⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒，則該圖1中①的DNA右側(cè)還能選擇BamHⅠ進(jìn)行切割，所以是能。

（5）因?yàn)橹匦滦纬傻闹亟M質(zhì)粒中沒(méi)有了BamHI識(shí)別的序列，所以不能被其切開(kāi)，但HindIII沒(méi)有改變，所以可以被其切割，故D正確。

（6）由圖可知③是轉(zhuǎn)錄，所以在不同組織細(xì)胞的相同DNA進(jìn)行過(guò)程③時(shí)啟用的起始點(diǎn)不完全相同，因?yàn)椴煌�組織細(xì)胞中基因會(huì)進(jìn)行選擇性表達(dá)。

（7）要想檢測(cè)基因是否表達(dá)應(yīng)采用抗原-抗體雜交技術(shù)。