Question

【題目】在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan′）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長．下圖為獲得抗蟲棉的技術流程．

請據圖回答：
（1）A過程需要的酶有 ．
（2）B過程及其結果體現了質粒作為運載體必須具備的兩個條件是 ．
（3）C過程的培養基除含有必要營養物質、瓊脂和激素外，還必須加入 ．
（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，D過程應該用作為探針．
（5）科學家發現轉基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規律．
①將轉基因植株與雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數量比為1：l．
②若該轉基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數量比為 ．
③若將該轉基因植株的花藥在卡那霉素培養基上作離體培養，則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占%．

Answer 1

【答案】
（1）限制性內切酶和DNA連接酶???????????????????????
（2）具有標記基因；能在宿主細胞中復制并穩定保存
（3）卡那霉素
（4）放射性同位素（或熒光分子）標記的抗蟲基因
（5）非轉基因植株；3：1；100
【解析】解：（1）基因表達載體的構建過程：首先用同一種限制酶切割目的基因和質粒，然后再用DNA連接酶把目的基因和運載體質粒連接成重組質粒．（2）B過程是培養并選擇含有重組質粒的土壤農桿菌，其中“選擇”體現了質粒作為運載體必須具備具有標記基因；“培養”體現了質粒作為運載體必須能在宿主細胞中復制并穩定保存．（3）C過程為誘導選擇，既要誘導出愈傷組織還要進行篩選，篩選出被含重組質粒的農桿菌侵染的葉片細胞，淘汰掉普通細胞，則放在含有卡那霉素的選擇培養基上進行選擇培養．（4）若利用DNA雜交技術檢測再生植株中是否含有抗蟲基因，一般用放射性同位素（或熒光分子）標記的抗蟲基因作為探針與再生植株DNA進行雜交，如果顯示出雜交帶，則表明目的基因已經導入受體細胞．（5）①后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數量比為1：1．說明此雜交方式為測交，抗卡那霉素型為顯性雜合體（Aa），卡那霉素敏感型為隱性純合子（aa），雜交后代表現型抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數量比為1：1．②抗卡那霉素型植株是顯性雜合體（Aa），該類型植株自交，即Aa×Aa，后代性狀分離比是抗卡那霉素型：卡那霉素敏感型=3：1．③如果培養基不加卡那霉素，那么其花藥離體培養形成再生植株中有一半是卡那霉素敏感型，另一半是抗卡那霉素型，所以將該轉基因植株的花藥在含有卡那霉素培養基上作離體培養時，卡那霉素對再生植株群體起到一個選擇作用，將卡那霉素敏感型全部淘汰，只留下抗卡那霉素型，因此培養基中全部是抗卡那霉素型，占總數的100%．
【考點精析】根據題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術的相關知識可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術．