Question

【題目】農業生產上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤。為修復被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明。

A B C D

(1) 微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作技術，該技術的核心是________，應該在________旁完成。圖中B、C所示操作的目的是將聚集的菌種逐步________。

(2) 在選育過程中，應將土壤浸出液接種于以________為唯一氮源的固體培養基上。為了篩選出高效的目的菌，可比較單菌落周圍透明圈的大小。實驗結果如右圖顯示的A～E五種菌株中，________是最理想菌株。

(3) 若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可采用的接種方法是________。對分離的細菌數目統計時，統計的菌落數目往往比活菌的實際數目________。

(4) 操作過程中有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培養細菌用的培養基與培養皿；②操作者的雙手；③玻棒、試管、燒瓶和吸管。其中需要滅菌的是________。(填序號)

Answer 1

【答案】(1) 無菌操作 酒精燈火焰 稀釋獲得單個菌落

(2) 該除草劑 E (3) 稀釋涂布平板法 少 (4) ①③

【解析】（1）微生物接種的技術核心是無菌操作，避免雜菌污染，應該在酒精燈火焰旁或無菌操作臺上完成。B操作為平板劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面，在數次劃線后培養，可以分離得到由一個細胞發育繁殖而來的單個菌落。

（2）該實驗是選育降解該除草劑的細菌，所以培養基上應以該除草劑為唯一氮源。透明圈越大，說明細菌降解的除草劑越多，即E效果最好，為最理想菌株。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個細胞，從而在培養基表面形成單個菌落。由于可能有沒有分散的細胞，或培養出的菌落彼此有重疊區域，則導致計數偏低。

（4）雙手無法滅菌，應采用消毒的方式減少手上的雜菌。但其他所有器皿，為保證不被雜菌污染，都需要滅菌。