Question

【題目】隨著全球環境的惡化和吸煙的影響，人類肺癌的發病率有上升趨勢。取人的肺癌細胞免疫過的小鼠以制備能和人的肺癌細胞特異性結合的單克隆抗體，可用于人類肺癌的免疫檢測，其制備流程如圖所示。請回答下列問題

（1）為獲得人的肺癌細胞免疫過的小鼠，需要將______________注射到小鼠體內。B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合的原理是_____________，該過程中可加入化學物質_____________促進細胞的融合。

（2）①過程使用的培養基為牛血清-HAT選擇培養基，與人工配制的培養基相比，利用血清培養動物細胞的優點是_________________________；HAT選擇培養基上的各種細胞中，_____________________________細胞都會死亡，從而篩選出所需的細胞。②過程要經過_______________________兩個階段，并進行多次篩選，最終才能獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。

（3）選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞后，還要將該雜交瘤細胞產生的特異性抗體與人的正常肺部細胞混合培養，其目的是篩選出___________________________；應用單克隆抗體檢測肺癌的優點在于__________________________________。

Answer 1

【答案】人的肺癌細胞 細胞膜的流動性 聚乙二醇（或PEG） 血清中含有細胞所需的一些人類未知的營養物質 未融合的親本細胞和融合的具有同種核的（或未融合的B淋巴細胞、未融合的骨髓瘤細胞、B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞） 克隆化培養和專一抗體檢測 能結合肺癌細胞，而不與正常肺部細胞結合的單克隆抗體 特異性強，靈敏度高

【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體。誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

（1）為獲得人的肺癌細胞免疫過的小鼠，需要將人的肺癌細胞當作抗原注射到小鼠體內。動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性，誘導動物細胞融合常用的化學方法是加入化學物質聚乙二醇（或PEG）。

（2）①與人工配制的培養基相比，血清中含有細胞所需的一些人類未知的營養物質；HAT選擇培養基中未融合的親本細胞和融合的具有同種核的（或未融合的B淋巴細胞、未融合的骨髓瘤細胞、B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞）細胞都會死亡，從而篩選出所需的細胞。

②過程要經過克隆化培養和專一抗體檢測兩個階段，并進行多次篩選，最終才能獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。

（3）為篩選出能結合肺癌細胞，而不與正常肺部細胞結合的單克隆抗體，選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞后，還要將該雜交瘤細胞產生的特異性抗體與人的正常肺部細胞混合培養；單克隆抗體的優點是特異性強，靈敏度高。