Question

【題目】EPO是促紅細胞生成素（Erythropoietin）的英文簡稱，是一種激素樣物質，可促進體內新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因，并采用中國倉鼠卵巢（CHO）細胞表達系統來獲取產物。其過程如下：

請回答下列問題：

（1）從人體組織中提取EPO的mRNA，通過逆轉錄得到____________，再通過PCR技術獲得大量EPO基因。

（2）供體母鼠通常情況下每次排卵8～12枚，為使其超數排卵，需注射_____________激素 以排出更多的卵子，培養到_____________時期與獲能的精子相遇時，精子首先發生___________反應，穿越放射冠和透明帶，完成體外受精。

（3）①過程構成了基因表達載體，內部包括不可缺少的組成部分，其中___________能驅動基因的轉錄。 （4）采用________技術，將重組表達載體導入小鼠受精卵中，將受精卵移入發育培養液中繼續培養。培養液成分除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，以及_______等物質。

（5）當胚胎發育至__________時期，向受體移植，為獲得更多個轉基因胚胎，要將__________均等切割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。此外，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行_________。

Answer 1

【答案】（1）cDNA

（2）促性腺，減數第二次，頂體

（3）啟動子

（4）顯微注射，血清

（5）桑椹胚或囊胚，內細胞團，性別鑒定

【解析】（1）獲取目的基因的方法可通過反轉錄法，故從人體組織中提取EPO的mRNA，通過逆轉錄得到cDNA，再通過PCR技術獲得大量EPO基因。

（2）為使供體母鼠超數排卵，需注射促性腺激素以排出更多的卵子，卵子需培養到減數第二次分裂中期時才能與獲能的精子相遇時，精子首先發生頂體反應，穿越放射冠和透明帶，完成體外受精。

（3）①過程為形成基因表達載體的過程，基因表達載體包括啟動子、終止子等，其中啟動子為RNA聚合酶結合的部位，能驅動基因的轉錄。

（4）

（5）胚胎移植時一般在桑椹胚或囊胚時期，為獲得更多轉基因胚胎，要將囊胚的內細胞團均等切割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。此外，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定。