Question

【題目】下圖是利用生物工程技術(shù)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的示意圖。質(zhì)粒上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同。據(jù)圖回答：

（1）將人生長(zhǎng)激素基因?qū)�入小鼠體內(nèi)來生產(chǎn)生長(zhǎng)激素。圖中對(duì)供體雌鼠甲用促性腺激素處理一段時(shí)間后與雄鼠乙交配，然后通過手術(shù)的方法從雌鼠甲的______中取出受精卵。

（2）①過程不能利用人的皮膚細(xì)胞，其原因是______________________________________。②過程是在____________酶的催化下，以__________________為原料合成相應(yīng)產(chǎn)物。

（3）從該生產(chǎn)過程看，為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選，切割質(zhì)粒時(shí)應(yīng)選用的酶是____________。

（4）大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)應(yīng)不含____________基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。

（5）如果從限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任選兩種酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割，均會(huì)將質(zhì)粒切成兩段，則形成的DNA片段有______種，其中含有完整四環(huán)素抗性基因的DNA片段占______。

Answer 1

【答案】輸卵管基因的選擇性表達(dá)（或皮膚細(xì)胞不能合成生長(zhǎng)激素的mRNA）逆轉(zhuǎn)錄酶脫氧核苷酸Pst I酶和EcoR I酶標(biāo)記（青霉素抗性基因(Ampr)和四環(huán)素抗性(Tetr) ）61/6

【解析】

（1）精子和卵細(xì)胞在輸卵管中受精形成受精卵，所以可以通過手術(shù)從雌鼠甲的輸卵管中取出受精卵，待受精卵發(fā)育到桑葚胚或囊胚時(shí)，才可以進(jìn)行胚胎移植。
（2）由于基因表達(dá)具有選擇性，人生長(zhǎng)激素基因只在垂體細(xì)胞中表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的mRNA和生長(zhǎng)激素，所以①過程不能利用人的皮膚細(xì)胞。②過程是逆轉(zhuǎn)錄過程，需要在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，以脫氧核苷酸為原料合成相應(yīng)產(chǎn)物。
（3）根據(jù)題意和圖示分析可知：破壞的是青霉素抗性基因，所以用限制酶PstI，而且要保證目的基因和質(zhì)粒定向連接，所以不能形成相同的黏性末端，故另一種酶選EcoRI酶。
（4）大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)應(yīng)不含Ampr和Tetr基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。
（5）用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ進(jìn)行切割，只有任意兩個(gè)位點(diǎn)被切斷且每次機(jī)會(huì)相等，任意兩種酶切割會(huì)形成2個(gè)DNA片段，所以切割三次共有6個(gè)片段且這些片段不等，既得到6種．只有同時(shí)用PstI酶和FcoRI酶切割時(shí)會(huì)得到一個(gè)完整四環(huán)素抗性基因的DNA片段，故概率為1/6。