Question

【題目】回答下列有關微生物工程的問題。乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應用價值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下：

（1）表中的培養液pH均為7．0，若要篩選微生物L，則不能選擇表中的_______培養液。

培養液	乳糖	乳糖酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgS4O7H2O	FeSO4
A	25g/L				1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
B			3g/L		1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
C	25g/L	1ug/L		3g/L	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
D	25g/L		3g/L		1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L

（2）為了獲得能產乳糖酶的微生物L的單菌落，可采用_______法將初篩菌液接種在固體培養基上。

（3）擴大培養微生物L時，通過增加營養物質的濃度_____________（可以//不可以）提高種群密度，分析說明原因_____________。

（4）在乳糖酶提取純化的過程中，應及時檢測___________。將酶固定化后，則有利于酶的__________。

（5）研究人員用篩選到產乳糖酶的高產菌株J1和J4在不同溫度和pH條件下進行發酵，測得發酵液中酶活性的結果見圖，推測菌株___________更適合用于發酵，理由是______________。

Answer 1

【答案】ABC 平板劃線法或稀釋涂布平板 不可以 擴大培養的液體培養基由于營養物質濃度增高，滲透壓也增高，不利于細菌生長 酶活力或酶活性 回收再利用 J4 發酵過程中會產熱和產酸，J4菌株在較高溫度和酸性環境下酶的活性更高

【解析】

本題是對常用的微生物的接種方法、培養基的成分和培養基配制過程、微生物實驗室培養過程中的無菌技術和選擇培養基的選擇作用的綜合性考查，結合相關知識，靈活應用。

（1）分析題干信息可知，該實驗的目的是篩選微生物L，因此所用的培養基應該是乳糖作為唯一碳源的培養基，且培養基的基本成分應包括碳源，氮源、水和無機鹽，分析表格中的培養基的成分可知，A培養基缺乏氮源，微生物不能生長；B沒有碳源，微生物應為無法生長，C不是以乳糖為唯一碳源，牛肉膏也可以作為碳源，因此A、B、C不能用于對篩選微生物L的培養基。
（2）接種微生物常用平板劃線法或稀釋涂布平板法，可將初篩菌液接種在固體培養基上。
（3）由于營養物質濃度增高，滲透壓也增高，不利于細菌生長，故擴大培養微生物L時，不能通過增加營養物質的比例提高種群密度。
（4）在乳糖酶提取純化的過程中，應及時檢測酶活力或酶活性。將酶固定化后，則有利于酶的回收再利用。
（5）由于發酵過程中會產熱和產酸，據圖中曲線可知，J4菌株在較高溫度和酸性環境下酶的活性更高，故J4更適合用于發酵。