Question

【題目】環境污染物多聚聯苯難以降解，受其污染的土壤中常有重金屬污染同時存在。研究發現聯苯降解菌內的聯苯水解酶是催化多聚聯苯降解的關鍵酶。回答下列問題：

（1）為了從富含多聚聯苯的環境中分離聯苯降解菌，培養基中加入多聚聯苯作為______，該培養基屬于______（填“選擇”或“鑒定”）培養基。用平板劃線法純化該細菌時，第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始是為了______。

（2）為了能夠反復利用聯苯水解酶，可以采用______技術，該技術的另一個優點是______。

（3）若從聯苯降解菌中分離并得到純度較高的聯苯水解酶，純化該酶常用的方法是______，采用該方法先分離出分子質量______的蛋白質。

（4）如圖實線表示聯苯水解酶催化的反應速度與酶濃度關系，虛線表示在其他條件不變情況下，底物濃度增加一倍，反應速度與酶濃度的關系，能正確表示兩者關系的是______

Answer 1

【答案】（唯一）碳源 選擇 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落 固定化酶 提高產物的純度 凝膠色譜法 較大 B

【解析】

培養基根據用途分為：選擇培養基、鑒別培養基。

常見的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術，包括包埋法、物理吸附法和化學結合法。

（1）為了從富含多聚聯苯的環境中分離聯苯降解菌，應該用以多聚聯苯作為唯一碳源的選擇培養基，只有聯苯降解菌可以存活。用平板劃線法純化該細菌時，在進行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

（2）為了能夠反復利用聯苯水解酶，可以采用固定化酶技術，該技術可使酶與產物分開，因此提高了產物的純度。

（3）純化該酶常用的方法是凝膠色譜法，該方法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法，相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此采用該方法先分離出分子質量較大的蛋白質。

（4）開始時，酶濃度較低，無論底物是否加倍都不能增加反應的速率；隨著酶濃度增大，增加底物，反應速率會增加，故選B。