Question

【題目】Ⅰ、某地因疫情變化管控升級，對境外或國內疫情重點地區來的人員，一律實行“14天集中隔離醫學觀察+14天居家隔離醫學觀察+2次核酸檢測+1次血清抗體檢測”的管控措施，做到凡進必檢、不漏一人、萬無一失。

Ⅱ、中國率先開啟新冠疫苗二期臨床研究，據研究新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在康復病人的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。下圖為某機構研制疫苗的部分過程。

請回答下列相關問題：

（1）對疫情重點地區輸入人員進行核酸檢測需要用到_____________________標記的目的基因做探針，進行血清抗體檢測的方法是______________。

（2）選擇性擴增S基因需要的前提條件及原因是___________________________。

（3）圖示過程用到的酶有______________，表達載體導入到動物細胞常用的方法是______________________。

（4）S基因在培養的動物細胞中穩定遺傳的關鍵是______________。

（5）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用動物細胞中表達的S蛋白與_____________進行雜交實驗，從而得出結論。

Answer 1

【答案】用含放射性同位素（或熒光素） 抗原—抗體雜交 找到S基因核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物 逆轉錄酶、Taq酶、限制酶和DNA連接酶 顯微注射法 S基因需要整合到細胞核中的DNA分子中 康復病人血清

【解析】

本題主要考察了基因工程的具體步驟，對目的基因進行檢測一般有三個層次的檢測，檢測目的基因是否插入受體細胞需要使用DNA分子雜交，檢測目的基因是否轉錄需要使用分子雜交法，這兩種方法都是應用了堿基互補配對原則，而檢測目的基因是否翻譯，則使用抗原—抗體雜交法，應用的原理是抗原和抗體特異性結合。

（1）對人體進行核酸檢測的時候，基因探針技術依據堿基互補配對原則，一般探針要用放射性同位素（或熒光素）標記，這樣可以顯示雜交帶；血清抗體檢測依據抗原與抗體的特異性結合，方法為抗原—抗體雜交；
（2）選擇性擴增S基因一般使用的技術為PCR技術，該技術擴增的前提條件為已知S基因核苷酸序列，根據這一序列可以合成引物；
（3）觀察題干可以發現，該技術涉及到RNA的逆轉錄過程、PCR技術、基因表達載體的構建等等，需要的酶有逆轉錄酶、Taq酶、限制酶和DNA連接酶；將重組質粒導入到動物細胞的常用方法為顯微注射法；
（4）S基因要在動物細胞中穩定遺傳，需要S基因整合到細胞核中的DNA分子中；
（5）一般檢測S蛋白的產生需要使用抗原—抗體雜交實驗，可用S蛋白與曾經感染但已經康復的病人血清進行雜交實驗，該個體的血清中有抗病毒S蛋白的抗體，從而驗證結論即可。