Question

【題目】下圖為某科研小組采用“基因靶向”技術先將小鼠的棕褐毛色基因導入黑色純種小鼠的ES細胞中，再將改造后的ES細胞移植回囊胚繼續發育成小鼠的過程。請據圖分析并回答問題。

(1)在目的基因獲取和構建基因表達載體過程中需要使用的限制酶是_______________，完成此過程還需要的工具酶是_______________ 。

(2)過程Ⅲ常用的方法是_______________。為提高操作的成功率，過程Ⅲ后，需篩選出_______________，才能進行過程IV。

(3)圖示技術表明，ES細胞在功能上具有_______________性；目前研究人員正嘗試通過科技手段利用ES細胞經過特殊誘導分化，為因故失去手的患者提供新的“手”，完成該過程的實質是_______________。

(4)若經圖示過程培育成的小鼠仍為黑色，則能否說明未成功導入棕褐毛基因？_______________，你的理由是_______________。

Answer 1

【答案】（1)Apal和EcoRI DNA連接酶 （2)顯微注射法 含小鼠棕褐毛基因的ES細胞 (3)發育的全能性 基因的選擇性表達 （4)不能 可能得到的是雜合小鼠，而黑色基因對棕褐色基因顯性（合理給分）

【解析】（1）重組質粒的構建需要兩種工具酶：限制性核酸內切酶和DNA連接酶。分析圖示可知，為了不破壞目的基因的結構，最好選用Apal和EcoRI兩種限制酶。（2）過程Ⅲ是將含目的基因的表達載體導入受體細胞內，常用的方法是顯微注射法。為提高操作的成功率，過程Ⅲ后，還需篩選出含小鼠棕褐毛基因的胚胎干細胞，才能將該ES細胞注射到囊胚中。（3）ES細胞在功能上具有發育的全能性的特點。誘導ES細胞過特殊分化為所需的組織器官，實質是基因選擇性表達的過程。（4）若培育成的小鼠仍為黑色，還不能說明未成功導入棕褐毛基因，因為可能得到的是雜合小鼠，而黑色基因對棕褐色基因顯性。