Question

【題目】“渥堆”是普洱茶生產過程中的一道特殊工序，是形成普洱茶品質特征最關鍵的一步。在“渥堆”過程中，曲霉、青霉、酵母菌、細菌等微生物的活動使茶葉所含茶多酚等成分發生了一系列復雜的物理、化學變化，促使了普洱茶甘滑、醇厚和陳香等良好品質特征的形成。請回答下列問題：

（1）牛肉膏蛋白胨培養基可用于“渥堆”茶樣中細菌的分離，其中的牛肉膏、蛋白胨可為細菌生長主要提供______________。配好的培養基常用______________法滅菌。接種培養后可根據______________顏色、形態、大小等特征及菌體革蘭染色情況細胞形態特征等進行初步鑒定。

（2）下圖為“渥堆”茶樣分離出的某種微生物亞顯微結構意圖，可根據圖中______________（填序號）結構判斷其肯定不是細菌。

（3）茶多酚中的兒茶素（C）有一定的抗菌作用，但作用較弱。研究人員用稀土離子Yb3+對兒茶素（C）進行化學修飾，形成配合物Yb3+一C，并探究其抗菌效果。將金黃色葡萄球菌制成菌懸液，分別加入等量的C、Yb3+和一定濃度的Yb3+-C，測定24h內金黃色葡萄球菌存活數量變化（用A600值表示，數值越大，表示細菌數量越多），結果如下圖。

由圖可以看出，______________能最有效縮短滅菌時間。

研究人員利用透射電鏡觀察了各組金黃色葡萄球菌細胞的超微結構，結果顯示：

（a）未加抗菌劑：細菌菌體較小，其細胞質分布均勻；

（b）C處理：細胞壁和細胞膜等結構不光滑，略顯粗糙；

（c）Yb3+處理：細胞質出現較明顯的固縮及空泡化現象；

（d）Yb3+-C處理：細胞壁及細胞膜等結構發生破裂，細胞質出現了嚴重的固縮及空泡化現象。

由此可見，兒茶素（C）作用的主要位點是______________，推測Yb3+-C具有更強抗菌作用的機理是______________。

Answer 1

【答案】碳源、氮源 高壓蒸汽滅菌 菌落 ②③⑥⑦ Yb3+-C 細胞壁和細胞膜（或細胞膜/細胞表面） 兒茶素作用于細胞表面，使Yb3+更容易進入細胞內，破壞細胞結構，導致細胞死亡

【解析】

牛肉膏蛋白胨培養基是微生物培養中常用的培養基，其中的蛋白胨為微生物的生長提供了碳源、氮源、維生素（特殊營養物質）等營養物質．制備的培養基一般用高壓蒸汽滅菌方法進行滅菌。欲將所取的金沙江水樣品進行大腸桿菌的分離與計數，可用稀釋涂布平板法來完成。

培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。菌落，是指由單個或少數微生物細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態、構造等特征的子細胞集團。

（1）含有碳（氮）元素且能被微生物生長繁殖所利用的一類營養物質統稱為碳（氮）源，牛肉膏、蛋白胨營養豐富，可為細菌生長主要提供碳源、氮源。培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。菌落，即是由一個單細胞繁殖而成，細菌體積小肉眼看不見，一般通過菌落來鑒定細菌。

（2）原核生物僅有的細胞器是核糖體，且原核生物沒有完整的細胞核，②為細胞核，③為內質網，⑥為線粒體，⑦為液泡，因此可根據圖中②③⑥⑦結構判斷其肯定不是細菌。

（3）從圖中可知，數值越小，表示細菌數量越少，因此Yb3+-C組能最有效縮短滅菌時間。a和b相比，自變量是是否經C處理，可見，兒茶素（C）作用的主要位點是細胞壁和細胞膜（或細胞膜/細胞表面）。a和c相比，自變量是是否經Yb3+處理，可見，兒茶素Yb3+作用的主要位點是細胞質。結合d組的結果可知，Yb3+-C具有更強抗菌作用的機理可能是兒茶素作用于細胞表面，使Yb3+更容易進入細胞內，破壞細胞結構，導致細胞死亡。