Question

【題目】一個由英國倫敦帝國學院和芬蘭圖爾庫大學的科學家組成的研究小組日前開發出一種通過大腸桿菌制造丙烷的新技術。科研人員要對大腸桿菌進行研究和利用，需要對大腸桿菌進行培養、分離、鑒定與計數等，請結合所學知識，回答下列問題：

（1）培養基配制時需要對培養基進行滅菌，采用的方法是_____________，實驗室常用的三種消毒方法的名稱是__________________________。在接種前通常需要檢測固體培養基是否被污染，檢測的方法是__________________________。

（2）圖1所示的方法是_____________，對分離得到的大腸桿菌可通過觀察菌落的_____________進行形態學鑒定。在5個平板上分別接入0．1mL稀釋液，經適當培養后，5個平板上菌落數分別是19、61、64，65和66，則1g土壤中的活菌數約為___________個。

（3）圖2是某同學利用不同于圖1方法分離菌株的示意圖。下列對其操作的敘述正確的有_____________。

a．操作前用無水乙醇對雙手進行消毒處理

b．不能將第⑤區域的劃線與第①區域的劃線相連

c．整個過程需要對接種環進行6次灼燒

d．平板劃線后培養微生物時要倒置培養

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒 將未接種的培養基放在恒溫箱中培養 稀釋涂布平板法 形狀、顏色、大小、隆起、邊緣、透明度、光澤等特征 bcd

【解析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。菌落數計算公式：每克樣品中的菌株數=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數。

（1）培養基配制時需要對培養基進行滅菌，采用的方法是高壓蒸汽滅菌，實驗室常用的三種消毒方法的名稱是：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒。在接種前通常需要檢測固體培養基是否被污染，檢測的方法是：將未接種的培養基放在恒溫箱中培養，觀察是否有菌落形成。

（2）由圖1的操作流程可以看出，圖1所示方法為：稀釋涂布平板法，對分離得到的大腸桿菌可通過觀察菌落的形狀、顏色、大小、隆起、邊緣、透明度、光澤等特征進行形態學鑒定。利用稀釋涂布平板法測定細菌數時，篩選平板上的菌落數為30～300，所以1g土壤中的活菌數為個。

（3）圖2是通過平板劃線接種操作。

a、操作前用70%的酒精溶液對接種人員的雙手進行消毒處理，a錯誤；

b、在劃線操作時不能將最后一區的劃線與第一區相連，因此不能將第⑤區域的劃線與第①區域的劃線相連，正確；

c、在每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，接種環的滅菌方法應是在火焰上灼燒，整個過程需要對接種環進行6次灼燒，c正確；

d、由于正放培養平板蓋子上的冷凝水會順著流到培養基上和外面，引起雜菌污染，因此平板劃線后培養微生物時要倒置培養，并且倒置有利于菌體呼吸，d正確。

故選bcd。