Question

【題目】酵母菌是發酵工程常用的微生物，在日常生活中也有廣泛應用。某興趣小組為了研究酵母菌種群數量的變化規律，進行了相關研究實驗，圖1為實驗流程，圖2為根據實驗測得數據繪制的曲線圖。請據圖回答：

(1)搖床又稱為自動振蕩器，培養時需將錐形瓶置于搖床上進行震蕩的目的是______________

(2)若本實驗使用的是如下規格的血球計數板，左下是一塊血球計數板正面示意圖，右下為計數板規格圖，該血球計數板上有________個計數室，在計數時一般采用_____________法進行取樣計數。若制備裝片時，將清潔干燥的血球計數板先在計數室上滴一滴酵母菌液，靜置5 min再蓋上蓋玻片，測量的結果會_____________。

(3)顯微觀察時在調焦清楚后，若發現只能看到血球計數板的橫線而看不到豎線，此時應____

(4)顯微計數時發現所選取的樣方中方格內酵母菌總數為零，可能的原因有(多選)（______）

A. 樣液中酵母菌數量過少

B. 樣液稀釋的倍數過大

C. 樣液取自于未搖勻的上清液

D. 實驗過程中部分酵母菌死亡

(5)分析圖2實驗數據得知，在0～7 d之間酵母菌的數量呈________增長：超過7d之后，由于_________________________________________________原因，酵母菌種群數量呈下降趨勢。

Answer 1

【答案】搖晃震動可以增加培養液中的溶氧量，利于酵母菌和反應底物的充分結合 2 五點取樣 偏高 調節反光鏡和光圈，將視野調暗 ABC “S型” 營養物質的大量消耗、代謝廢物的積累、培養液pH的變化

【解析】

探究培養液中酵母菌數量的動態變化的實驗原理：
（1）酵母菌可以用液體培養基來培養，培養液中的酵母菌種群的增長情況與培養液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關，我們可以根據培養液中的酵母菌數量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數量的變化情況。
（2）利用血球計數板在顯微鏡下直接計數是一種常用的細胞計數法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數目，所以一般用于單細胞微生物數量的測定，由于血球計數板上的計數室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據在顯微鏡下觀察到的細胞數目來計算單位體積的細胞的總數目。

(1) 搖床又稱為自動振蕩器，培養時需將錐形瓶置于搖床上進行震蕩的目的是搖晃震動可以增加培養液中的溶氧量，利于酵母菌和反應底物的充分結合。

(2) 由圖可知該血球計數板上有2個計數室，在計數時一般采用五點取樣法進行取樣計數。先將培養液滴加到血球計數板的計數室中再蓋上蓋玻片計數，由于已加入的液滴的表面張力作用使其未能嚴密的蓋到計數板表面上，使計數室內的體積增大，從而使計數結果偏高。故制備裝片時，應先蓋蓋玻片再滴培養液。

(3) 顯微觀察時在調焦清楚后，若發現只能看到血球計數板的橫線而看不到豎線，說明對光不準確，此時應該調節反光鏡和光圈，將視野調暗。

（4）顯微計數時發現所選取的樣方中方格內酵母菌總數為零，可能的原因有：樣液中酵母菌數量過少、樣液稀釋的倍數過大、樣液取自于未搖勻的上清液；而實驗過程中部分酵母菌死亡，死亡的酵母菌仍然存在于視野中，不會出現視野中酵母菌總數為0，故ABC符合題意，D不符合題意。

(5) 分析圖2實驗數據得知，在0～7d之間酵母菌的數量呈“S型”增長；超過7d之后，由于營養物質的大量消耗、代謝廢物的積累、培養液pH的變化原因，酵母菌種群數量呈下降趨勢。