Question

【題目】高濃度酒精會抑制酵母菌活性，因而在米酒制作中，要篩選耐酒精能力較強和發酵性能優良的酵母菌。某實驗小組進行了如下實驗：

（1）準備：1酵母菌在-20℃長期保存，菌液中常需要加入一定量的____________（氯化鈣、蒸餾水或甘油）

2為了解發酵液中酵母菌的數量，可采用_______________法接種。若1mL發酵液稀釋105倍，在三個平板上分別接入0.2mL稀釋液，經適當培養后，三個平板上的菌落數分別為33、38、37，則1mL發酵液中有__________個酵母菌。

（2）原理：由于酵母菌在酒精發酵中產生_________，隨著發酵時間的延續，瓶重逐漸減輕。

（3）步驟：1 將等量的三種品系酵母菌分別接種在_________濃度為6%、8%、10%、12%的等量液體培養基中。

2 在相同且適宜條件下密閉發酵。

3 每天相同時間，輕輕搖晃瓶子后，____________，并稱重發酵瓶。

（4）結果分析：在某濃度下，小組測定實驗結果如圖所示。

根據圖示，則Y1比Y3更適合作為生產米酒的菌種。理由是________________。

Answer 1

【答案】 甘油 稀釋涂布平板 1.8×107 CO2 酒精 擰松瓶蓋(或放氣) Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（產生CO2的量/發酵速率/發酵能力）大于Y3（Y3前期發酵能力不如Y1），所以Y1耐酒精能力強

【解析】試題分析：菌種長期保存應采用甘油管藏法，保存在-20℃的環境中。為了分離、純化和計數酵母菌，常常采用稀釋涂布平板法進行接種培養，等到平板上形成穩定的菌落后，然后選取菌落數范圍落在30—300個的稀釋倍數作為估算的數據，進行求平均值。為了篩選耐酒精能力較強和發酵性能優良的酵母菌，應將不同品系的酵母菌接種在不同酒精濃度的培養液中，依據酵母菌在酒精發酵中產生CO2而導致培養液質量減輕的多少為指標，推測不同品系的酵母菌的耐酒能力和發酵性能。分析實驗結果的三條曲線可知，Y1和Y2都比Y3耐酒能力強且發酵性能好；并且Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（產生CO2的量/發酵速率/發酵能力）大于Y3（Y3前期發酵能力不如Y1），所以Y1耐酒精能力最強。

（1）根據前面的分析可知，長期保藏菌種的試管內應加甘油，一方面防止外來雜菌干擾，另一方面隔絕空氣。

（2）根據前面的分析可知，分離計數培養液中菌體數量，應選用稀釋涂布平板法接種。根據題意，1mL發酵液中有（33+38+37）÷3÷0.2×105=1.8×107個酵母菌。

（3）為了篩選耐酒精能力較強和發酵性能優良的酵母菌，依據的原理是酵母菌在酒精發酵中產生CO2逐步釋放，所以隨著發酵時間的延續，瓶重逐漸減輕。

（4）本實驗的思路：將等量的三種品系酵母菌分別接種在不同酒精濃度的等量液體培養基中，放在相同且適宜條件下密閉發酵，每天相同時間，輕輕搖晃瓶子后，擰松瓶蓋釋放CO2氣體，并稱重發酵瓶。分析實驗結果，Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（產生CO2的量/發酵速率/發酵能力）大于Y3（Y3前期發酵能力不如Y1），由于Y1比Y3更適合作為生產米酒的菌種。