Question

研究人員為了制備煙草（四倍體,4n=48）的葉片細胞與紫羅蘭（二倍體，2n=14）的紫色花瓣細胞的原生質體，并誘導其融合形成紫羅蘭煙草植株，進行了如下實驗：
一、原生質體的制備
酶解法制備原生質體的原理是利用酶溶液對細胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提取；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實驗小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實驗結果列于下表。請回答有關問題。

試管編號 項目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸餾水（mL）	2	0	1	1	1	1
緩沖液（mL）	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果膠酶液（mL）	0	0	0	0.5	0	0
蝸牛酶液（mL）	0	0	0	0	0.5	0
纖維素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0.5
實驗結果（綠色深淺程度）	—	—	—	+ + +	+ + + +	+ +

（注：“+”越多表示綠色越深，“—”表示顏色無顯著變化）
（1）實驗過程中，需要輕搖試管，其目的是                            ，使原生質體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。
（2）從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有         
等多種酶。該實驗中           是空白對照組，其設置意義是      　　     。
（3）如果對制取的煙草葉肉細胞原生質體是否還有活性進行檢驗，其檢驗的方法可以是                       。
二、用同樣方法制取紫羅蘭花瓣細胞原生質體懸浮液
三、原生質體融合

將等量的紫羅蘭花瓣細胞原生質體懸浮液與煙草葉肉細胞原生質體懸浮液加入到裝有20%的PEG溶液的離心管中混合后，離心10min，將分離得到的融合成團的原生質體懸浮液與含有瓊脂的液體培養基混合均勻后，凝固形成很薄的平板。再利用有關顯微鏡觀察、鑒定融合的原生質體。請分析：
（4）步驟三中，若所有的原生質體均兩兩融合，則所得到的某一個融合的原生質體中含有的染色體數可能是                。
（5）只利用顯微鏡觀察，不借助其他手段       
   （能，不能）鑒別出雜種融合的原生質體，你所依據的觀察現象是                         。
四、制取紫羅蘭煙草的人工種子
（6）如右圖2中，包埋形成人工種子過程中，先適當加熱使海藻酸鈉溶化，然后將溶化的海藻酸鈉溶液                      ，再加入                  充分攪拌混合均勻。
若將得到的人工種子播種后成長為成紫羅蘭煙草植株，雜種植株為      倍體。

Answer 1

（1）為了使細胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果
（2）果膠酶和纖維素酶   Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ      排除無關變量的干擾
（3）放入低濃度溶液（或清水）中，看是否被漲破。
（4）28,或62或96 
（5）能  原生質體中既有葉綠體，又有紅色液泡
（6）冷卻至室溫   胚狀體  六

解析