Question

【題目】尿素是一種重要的氮肥，農作物不能將其直接吸收利用，而是通過土壤中的細菌將其分解為氮和CO2后才能被農作物利用。請回答下列問題：

（1）土壤中的某些細菌能分解尿素是因為該種細菌能合成____________。

（2）為篩選尿素分解而制備的培養基中含有的營養物質除尿素外還包括水、碳源____________等，該培養基能篩選出目的菌株的原因是________________________。

（3）一般依據尿素分解菌菌落的____________、隆起程度和顏色等特征來統計菌落數目。現將10mL尿素分解菌懸液進行梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數為106的樣液接種到3個培養基上，培養一段時間后，統計菌落數分別為39、42、45，則1mL懸液中活細菌數量為____________個。上述過程采用的接種方法是________________________。

（4）為檢驗培養基及培養皿滅菌是否合格，可采取的措施是________________________。

Answer 1

【答案】 脲酶 無機鹽 只有以尿素作為唯一氮源的細菌才能在該培養基上生長 形態、大小 4.2×108 稀釋涂布平板法 單獨設置一個滅菌后不接種樣液的培養皿（含培養基）進行培養

【解析】本題考查分解尿素的微生物的培養與計數，要求考生理解脲酶的作用，能配制合適的培養基培養細菌并進行計數。

（1）脲酶能催化尿素分解為氨氣和二氧化碳，土壤中的某些細菌能分解尿素是因為該種細菌能合成脲酶。

（2）為篩選尿素分解而制備的培養基中含有的營養物質除尿素外還包括水、碳源、無機鹽等，該培養基能篩選出目的菌株的原因是只有以尿素作為唯一氮源的細菌才能在該培養基上生長。

（3）一般依據尿素分解菌菌落的形態、大小、隆起程度和顏色等特征來統計菌落數目。現將10mL尿素分解菌懸液進行梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數為106的樣液接種到3個培養基上，培養一段時間后，統計菌落數分別為39、42、45，則1mL懸液中活細菌數量為（39+42+45）30.1×106=4.2×108個；上述過程采用的接種方法是稀釋涂布平板法。

（4）為檢驗培養基及培養皿滅菌是否合格，可單獨設置一個滅菌后不接種樣液的培養皿（含培養基）進行培養，若該培養皿中沒有出現菌落，則說明該培養基及培養皿滅菌合格。

項目	優點	缺點	適用范圍
平板劃線法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數	適用于好氧菌
稀釋涂布平板法	可以計數，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧菌和兼性厭氧菌