Question

【生物——現代生物科技專題】2008年1月7日，東北農業大學培育出我國第二代綠色熒光蛋白轉基因克隆豬。研究人員是先從一種特殊水母中提取綠色熒光蛋白基因，然后把該基因經過處理后轉移到培養的豬胎兒成纖維細胞的基因組中，再把轉基因體細胞的細胞核移植到成熟的去核豬卵母細胞中構建成轉基因胚胎。再經過手術移植入受體母豬，經過發育最終獲得綠色熒光蛋白轉基因克隆豬。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的培育過程示意圖。請據圖回答：

⑴過程①和②必需用到的酶是                      。

⑵重組質粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有                才能構成一個完整的基因表達載體。

⑶為了獲得更多的豬卵母細胞，可通過對母豬注射          的方法，做超數排卵處理，并將所采集到的卵母細胞在體外培養到         期即可通過顯微操作將其細胞核去除。

⑷早期胚胎的培養液成分較復雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，以及          等物質。

⑸如果想同時得到多頭綠色熒光蛋白轉基因克隆豬，可通過胚胎分割技術得以實現。但應選擇              的早期胚胎進行操作，且要注意              ，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。

⑹與一般的繁育良種動物方式相比較，胎移植的優勢是                       。

Answer 1

（共8分，每空1分）⑴限制酶和DNA連接酶（缺一不可）  ⑵啟動子、終止子和標記基因（缺一不可）⑶促性腺激素  減數第二次分裂中期  ⑷血清  ⑸發育良好、形態正常的桑椹胚或囊胚   將內細胞團均等分割 ⑹可充分發揮雌性優良個體的繁殖潛力

解析:

主要考查了基因工程和胚胎工程有關的知識點�；�因工程的工具有限制酶、DNA連接酶、運載體等。基因工程的核心是基因表達載體的構建，一個完整的基因表達載體包括目的基因、標記基因、啟動子和終止子等四部分。卵母細胞的獲取，一般采用注射促性腺激素，使動物超數排卵，然后從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。對于大型的動物或大家畜，也可以采用活體采卵的方式。當卵母細胞培養到減數第二次分裂中期時才具有受精的能力。早期胚胎一般用發育培養液培養，其成分比一般的要復雜，還要加入血清等物質。在進行胚胎分割時，一般選擇發育良好、形態正常的囊胚或桑椹胚，且要注意將內細胞團均等分裂，否則會影響到分割后胚胎的恢復和進一步發育。胚胎移植具有充分發揮雌性優良個體的繁殖潛力。