Question

【題目】如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線．圖中tetR表示四環素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、Sma I直線所示為三種限制酶的酶切位點．據圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養基上進行．能驅動人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控因子是圖中的 ．過程①采用的操作方法通常是 ．
（2）過程②代表的生物技術是 ．對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體．目前最常見的是經分割產生的同卵 胎．
（3）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用 技術．
（4）對代孕牛的要求是

Answer 1

【答案】HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素；啟動子；顯微注射；胚胎移植；雙；抗原﹣抗體雜交；有健康體質和正常繁殖能力
【解析】解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點，其中限制酶SmaI的切割位點位于目的基因上，所以獲取目的 基因和構建基因表達載體時，應用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質粒后，會破壞質粒上的四環素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養基上進行．啟動子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序 列．過程①是將重組質粒導入受體細胞，當受體細胞是動物細胞時，將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）過程②需要采用胚胎移植技術；目前最常見的是經胚胎分割產生的同卵雙胎．
（3）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用抗原﹣抗體雜交技術．
（4）對代孕牛的要求是有健康體質和正常繁殖能力．
【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術即可以解答此題．