Question

【題目】如圖為采用基因工程技術生產海參溶菌酶（SL）的流程．請回答下列問題：
（1）過程I中首先在作用下合成海參溶菌酶cDNA，再以cDNA為模板擴增合成SL目的基因，擴增過程中要用到的酶是 ．
（2）過程II中構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生末端．若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生（填“相同”或“不同”）黏性末端的限制酶．
（3）若要檢驗SL目的基因是否成功表達，可以用技術，若沒有出現相應的雜交帶，則需要用做探針來檢驗是否轉錄出mRNA．
（4）溶菌酶廣泛存在于動物的組織、體液及分泌物中，主要通過破壞細菌的細胞的裂解，在動物的免疫中發揮重要作用．

Answer 1

【答案】
（1）逆轉錄酶；熱穩定DNA聚合酶
（2）平；相同
（3）抗原﹣抗體雜交；放射性同位素標記的目的基因
（4）細胞壁；非特異性
【解析】解：（1）Ⅰ表示以RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程，該過程需要逆轉錄酶的催化；擴增目的基因需要采用PCR技術，其技術需要在較高溫度下進行，因此需要熱穩定DNA聚合酶．（2）限制酶切割既可產生黏性末端，也可產生平末端；切割目的基因和切割質粒最好使用同種限制酶，以產生相同的黏性末端．（3）檢測目的基因是否表達出蛋白質可采用抗原﹣抗體雜交技術；探針是用放射性同位素標記的目的基因．（4）溶菌酶主要通過破壞細菌的細胞壁而使細菌裂解；體液中的溶菌酶屬于免疫中的第二道防線，在非特異性免疫中有重要作用． 所以答案是：（1）逆轉錄酶；熱穩定DNA聚合酶；（2）平；相同；（3）抗原﹣抗體雜交；放射性同位素標記的目的基因；（4）細胞壁；非特異性
【考點精析】掌握基因工程的原理及技術是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術．