Question

【題目】回答下列(1)、(2)小題：
（1）隨著社會的發展，石油產品的使用越來越多，石油烴污染也越來越嚴重。為了篩選出分解石油烴能力強的微生物，人們不斷地進行研究。下圖為獲取能分離出分解石油烴的微生物的土壤樣品后的研究過程，請回答有關問題：

⑴獲取土壤樣品的取樣地點最好選在。為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過程①④所用的選擇培養基只能以石油烴作為唯一碳源，其原因是。
⑵根據⑤平板上生長的菌落，對④進行接種采用的方法是法，若發現在⑤中無法區分菌落，可以將圖中③取出的菌液。
⑶純化菌株時，通常使用的劃線工具是。采用方法對其進行滅菌。劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是(寫出一點即可)。
（2）毛角蛋白Ⅱ型中間絲(KIFⅡ)基因與絨山羊的羊絨質量密切相關。獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖。

⑴獲取外源基因用到的工具酶是。
⑵在過程②中，用酶處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。把一個單細胞從群體中分離出來單獨培養，使之繁衍成一個新的細胞群體的技術，叫細胞克隆。未經克隆化的細胞系具有性。由于人們對動物細胞所需營養物質還沒有完全搞清楚，因此在培養細胞時需在培養基中加入一定量的 ， 在培養過程中應將培養瓶置于培養。
⑶若要獲得多只相同的轉基因山羊，可對圖中早期胚胎進行后進行胚胎移植。
⑷下列有關轉基因山羊培育過程的敘述，錯誤的是。
A．圖中重組細胞的細胞核來自導入目的基因的細胞
B．重組細胞最初分裂時開始進行DNA復制和基因的轉錄
C．將早期胚胎(如早期囊胚)植入到代孕母羊的輸卵管或子宮角部位
D．如果KIFⅡ基因的序列是已知的，則可用化學方法合成或用聚合酶鏈反應擴增該基因

Answer 1

【答案】
（1）石油烴污染明顯處,只有能利用石油烴的微生物能正常生長繁殖,涂布分離,進行（梯度）稀釋,接種環,灼燒,接種環灼燒后未冷卻；劃線未從第一區域末端開始劃線
（2）限制性核酸內切酶,胰蛋白酶,異質,動物血清,CO2培養箱,胚胎分割,B
【解析】解：（1）⑴要獲取相應的菌種，應到相應的環境中獲取，獲取土壤樣品的取樣地點最好選在石油污染明顯處。⑵常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。⑶接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落。(2）分析題圖：圖示是獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細胞培養過程；③表示從成年母絨山羊中獲取卵母細胞。⑴表示基因表達載體的構建過程，該過程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，其次還要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。⑵②表示動物細胞培養過程，該過程中要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理將皮膚組織塊，使之分散成單個成纖維細胞。未經克隆化的細胞系具有異質性。由于人們對動物細胞所需營養物質還沒有完全搞清楚，因此在培養細胞時需在培養基中加入一定量的動物血清，在培養過程中應將培養瓶置于CO2培養箱培養。⑶從重組細胞到早期胚胎需要采用（早期）胚胎培養技術．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎。⑷A.圖中重組細胞的細胞核來自導入目的基因的細胞，A正確；

B.重組細胞最初分裂前就有基因的轉錄，B錯誤；

C.將早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的輸卵管或子宮角部位，便于早起胚胎的著床，C正確；

D.化學方法合成或用聚合酶鏈式反應擴增可用于獲取已知序列的目的基因，D正確

【考點精析】根據題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術和胚胎分割移植的相關知識可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術；胚胎分割是用機械方法將早期胚胎切割成2、4、8等分等，經移植獲得同卵雙胎或多胎的技術．由于來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質，因此胚胎分割可看作是動物無性繁殖或克隆的方法之一．