Question

【題目】微生物的培養在生物科學史和現代生物工程中都是極其重要的基礎技術。下圖1是某學生重復艾弗里證明DNA是遺傳物質實驗的其中一組實驗；下圖2是基因工程中運用影印法將培養基A上的菌落按原來方向印在培養基B上，以檢測重組質粒是否導入大腸桿菌的示意圖，請據圖回答下列問題。

（1）圖1、圖2的培養結果顯示，兩實驗中使用的都是__________（填物理狀態）培養基。

（2）在配制圖2中的培養基時。除考慮營養、pH、滲透壓等條件外還要考慮在培養基A和B中加入______（填“相同”或“不同）種類的抗生素。在配制含瓊脂的培養基和倒平板的過程中，下列選項不需要的是______（填序號）。①酒精燈 ②接種環 ③高壓蒸汽滅菌鍋 ④培養皿

（3）培養基滅菌是避免雜菌污染的有效途徑之一。適用于圖1、圖2所示培養基的滅菌方法是_________；接種前還需檢測滅菌效果。方法是將____________________置于恒溫箱中，在適宜溫度下培養一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生。

（4）實驗證明，上述兩項實驗中R型菌和大腸桿菌的轉化率都很低。為獲得圖1、圖2所示的培養結果，一是要設法提高圖1中S型菌的_________________ ；二是要使用恰當的方法接種。兩實驗都不能用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種，而應采用不加稀釋的涂布平板法接種R型菌和大腸桿菌，理由是_______ 。接種培養4天后，可通過觀察______的形態特征來識別R型菌和大腸桿菌。

Answer 1

【答案】 固體 不同 ② 高壓蒸汽滅菌法 未接種的培養基 DNA純度 平板劃線法和稀釋涂布平板法都可能因稀釋后菌種數量極少而無法觀察到轉化成功的菌落 菌落

【解析】試題在肺炎雙球菌的轉化實驗中，格里菲斯證明：在S型細菌存在某種轉化因子；而艾弗里將S型細菌的DNA、蛋白質、糖類等物質分離開，分別與R型細菌混合再注射到小鼠體內，證明DNA是遺傳物質。

（1）據圖分析，兩個圖中的培養基上都出現了菌落，說明兩個實驗使用的都是固體培養基。

（2）圖2中培養基A和B的作用不同，所以加入的抗生素也不同。在配制含瓊脂的培養基和倒平板的過程中，需要用到酒精燈、培養皿和高壓蒸汽滅菌鍋，但是不需要用接種環。

（3）對微生物的培養基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。為了檢測滅菌的效果，可以將未接種的培養基置于恒溫箱中，在適宜溫度下培養一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生。

（4）由于上述兩項實驗中R型菌和大腸桿菌的轉化率都很低，為了提高轉化的效果，對于圖1應該設法提高S型菌的DNA的純度；對于圖2要使用恰當的方法接種。由于平板劃線法和稀釋涂布平板法都可能因稀釋后菌種數量極少而無法觀察到轉化成功的菌落，所以兩實驗都不能用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種，而應采用不加稀釋的涂布平板發接種R型菌和大腸桿菌。不同的細菌形成的菌落不同，所以可以通過觀察菌落的形態特征來識別R型菌和大腸桿菌。