Question

【題目】科研人員利用精子作為載體，將人胰島素基因（hINS）轉入綿羊體內（圖中BLG是羊的乳腺蛋白基因），以獲得動物乳腺生物反應器，使羊的乳汁中含有人胰島素。其技術流程如下：

請回答下列相關問題：

（1）構建的BLG-hINS重組質粒中目的基因的首端是________________，將重組質粒導入精子中的方法是_________________。

（2）給供體母羊注射促性腺激素，目的是使其________。在體外受精前，要對精子進行_______處理。在胚胎移植過程中，受體選擇好后要用激素進行_________處理，其目的是_________，以保證移植的胚胎能夠繼續正常發育。

（3）為獲得轉基因母羊，在進行移植前，還需取滋養層細胞進行___________。將早期胚胎移植至代孕母羊體內時，不宜選擇_________（填“原腸胚”、“桑椹胚”或“囊胚”）時期的胚胎。

（4）欲增加圖中早期胚胎的數量，可通過胚胎工程中的___________技術來實現，在對囊胚進行操作時應注意________________________。

Answer 1

【答案】乳腺蛋白基因啟動子顯微注射技術超數排卵獲能同期發情使受體和供體有相同的生理狀態（生理環境）（DNA分析）性別鑒定原腸胚胚胎分割將內細胞團均等分割

【解析】

解答本題需要掌握以下知識點：1、將目的基因導入不同的受體細胞所采用的方法不同。導入植物細胞：農桿菌轉化法（轉基因抗蟲棉用的是花粉管通道法）；導入動物細胞：顯微注射技術（注射入受精卵中）；導入原核生物：一般是將細菌用氯化鈣處理，以增大細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養、精子的采集和獲能、受精；2、胚胎移植的基本程序主要包括：；①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。3、動物早期胚胎培養，培養液的成分無機鹽、有機鹽類、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分以及動物血清等。

（1）重組質粒除了含有目的基因以外，還必須有啟動子、終止子及標記基因，其中乳腺蛋白基因啟動子位于目的基因的首端，將目的基因導入不同受體細胞有不同的方法，將重組質粒導入精子（動物細胞）中的方法是顯微注射技術。

（2）對供體母羊注射促性腺激素可促使其超數排卵。采集的精子需要經過獲能處理才具備受精能力。在胚胎移植過程中，用激素對供受體進行同期發情處理的目的是使供、受體的生理狀態相同，以保證移植的胚胎能夠繼續正常發育。

（3）只有母羊能分泌乳汁，為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進行移植，取滋養層細胞進行（DNA分析）性別鑒定不會影響胚胎正常發育。胚胎移植時，因為原腸胚時期的細胞已經分化為三個胚層且已經開始與母體建立生理與組織上的聯系，因此一般選用桑椹胚或囊胚進行胚胎移植，而不能選用原腸胚。

（4）胚胎分割是指借助顯微操作技術或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植給受體母畜，從而獲得同卵雙胎或多胎的生物學新技術。欲增加圖中早期胚胎的數量，可通過胚胎工程中的胚胎分割技術來實現，囊胚階段的內細胞團將來發育成胎兒的各種組織，如果分割不均勻，會影響著分割的胚胎發育，因此在對囊胚進行操作時應注意將內細胞團均等分割。