Question

【題目】研究人員利用生物工程技術，探究豬bmp15基因在不同組織細胞中的特異性表達。該工程技術基本流程如下圖(EGFP基因控制合成增強型綠色熒光蛋白；過程②表示表達載體2成功導入各組織細胞)。請回答：

(1)過程①中，需利用________________限制酶處理表達載體1。

(2)過程②中，常采用________技術將表達載體2成功導入受體細胞。

(3)在實驗結果的基礎上，提取上述豬肌肉細胞的____________(填“mRNA”或“DNA”)，利用標記的________作探針，進行分子雜交，可進一步探究豬bmp15基因特異性表達的原因。

Answer 1

【答案】 XhoⅠ和Hind Ⅲ 顯微注射 mRNA EGFP基因

【解析】試題分析：本題以探究實驗為背景，考查了基因工程的基本操作流程。從圖中目的基因上限制酶的切割位點，判斷出過程①采用的限制酶的種類；通過基因表達的含義及目的基因分子水平的檢測方法來完成（3）的作答。

（1）表達載體需要用和切割目的基因的限制酶相同，保證有相同的粘性末端便于連接，由圖可知目的基因是用XhoⅠ和HindⅢ酶切的，故表達載體1也需要用XhoⅠ和HindⅢ酶切。

（2）過程②中，將表達載體2導入動物細胞常用顯微注射技術。

（3）檢測bmp15基因是否特異性表達應檢測是否存在該基因轉錄出的mRNA，故應提取上述豬肌肉細胞的mRNA，利用標記EGFP基因作為探針，進行分子雜交，若出現雜交帶，則表示bmp15基因發生了表達。