Question

現有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學物質，實驗室研究人員欲通過動物細胞培養的方法來鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強弱。請你以一個研究人員的身份參與此項研究，完成下列實驗報告并回答有關問題。

Ⅰ.實驗原理：                                                              。

根據這種變異細胞占全部培養細胞的百分數（以下稱Q值），可判斷該化學物質的毒性。

Ⅱ.實驗材料：活的小白鼠胚胎。

Ⅲ.藥品用具：胰蛋白酶液、動物細胞培養液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養皿、剪刀、錐形瓶、培養瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡

Ⅳ.實驗步驟

（1）制備細胞懸浮液

把活的小白鼠胚胎放在培養皿中剪碎，轉入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養液，制成細胞懸浮液。

（2）進行細胞培養

①取A、B、C三個潔凈的培養瓶，                                             。

②向A培養瓶中加入化學物質甲，向B培養瓶中加入等量的化學物質乙，并將培養瓶搖勻。

③向C瓶內                                                                 。

（3）制作臨時裝片

①當細胞增殖到大約第8代左右時，同時從恒溫箱中取出三個培養瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養的細胞從瓶壁上脫落，再加入動物細胞固定液以便迅速殺死細胞并固定細胞。

②靜置一段時間后，分別從各培養瓶底部吸取適量的細胞懸浮液，滴在與培養瓶有相同編號的載玻片的中央，      ，3~5 min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統計

把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于          期的細胞，并與

        對比以確認發生變異的細胞，同時統計該期變異的細胞占該期細胞總數的百分數（Q值）。

Ⅴ.結果與結論

經研究人員實驗得知：A、B、C三個培養瓶的Q值依次為：Q_A=1.3%、Q_B=12.5%、Q_C=0.1%，由此可知該實驗的結論是                                                       。

Ⅵ.回答問題

在實驗中，C培養瓶起什么作用？               。

Answer 1

Ⅰ.有毒物質能誘導細胞產生變異

Ⅳ.（2）①消毒滅菌，加入等量的細胞懸浮液

③加入等量生理鹽水，并搖勻。

（3）②用適宜濃度龍膽紫溶液染色

（4）細胞有絲分裂中  C組

Ⅴ.甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲

Ⅵ.對照

解析:

本題主要是通過細胞培養來考查實驗設計。有毒物質會引起細胞染色體的變異，在細胞培養液中加入待測物質，通過觀察細胞是否發生變異以及變異細胞的數量來檢測待測物質是否有毒。設計實驗時需要遵循單一變量原則、等量原則和對照原則，同時需要對題干內容前后聯系來看，根據研究人員的實驗結果可知A組和B組為實驗組，C為對照組，并不是任意設置的；首先應向三組加入等量的已制備的細胞懸浮液；設置對照時應向C組加入等量的生理鹽水；鑒定是否發生染色體變異時需要通過顯微鏡來鏡檢，需要制作裝片同時要對染色體進行龍膽紫染色；觀察染色體的最佳時期是有絲分裂的分裂中期。