Question

【題目】科學家將外源目的基因與大腸桿菌的質粒進行重組，并在大腸桿菌中成功表達．如圖表示構建重組質粒和篩選含目的基因的大腸桿菌的過程．請據圖回答：

（1）步驟①和②中常用的工具酶有 ．
（2）經過①和②步驟后，有些質粒上的基因內插入了外源目的基因，形成重組質粒．
（3）步驟③是的過程．
（4）步驟④：將三角瓶內的大腸桿菌接種到含四環素的培養基C上培養，目的是篩選 ． 能在C中生長的大腸桿菌有種．
（5）步驟⑤：用無菌牙簽挑取C上的單個菌落，分別接種到D（含氨芐青霉素和四環素）和E（含四環素）兩個培養基的相同位置上，一段時間后，菌落的生長狀況如圖所示．含目的基因的菌落位于（選填“D”或“E”）上，請在圖中相應的位置上圈出來 ．

Answer 1

【答案】
（1）限制性內切酶，DNA連接酶
（2）氨芐青霉素抗性
（3）將重組質粒（目的基因）導入大腸桿菌（受體細胞）
（4）含四環素抗性基因的大腸桿菌；2
（5）E；
【解析】解：（1）將質粒切割開用限制酶，將目的基因與質粒連接起來用DNA連接酶．（2）由圖中限制酶切割位置可知，目的基因插入的位置是氨芐青霉素抗性基因中．（3）步驟③是基因工程第三步：將目的基因導入受體細胞．（4）培養基C是選擇培養基，培養基中有四環素，專一篩選含四環素抗性基因的大腸桿菌，能在C中生長的大腸桿菌有兩種，分別是抗四環素和同時抗四環素和含氨芐青霉素的大腸桿菌．（5）D培養基中大腸桿菌對四環素和含氨芐青霉素都抗，而E中只抗一種四環素，所以在E中對應區域（D中沒有菌落的部位），該處為轉基因大腸桿菌．
答案：（1）限制性內切酶，DNA連接酶（2）氨芐青霉素抗性（3）將重組質粒（目的基因）導入大腸桿菌（受體細胞）（4）含四環素抗性基因的大腸桿菌 2 （5）E
【考點精析】通過靈活運用基因工程的應用，掌握植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物，利用轉基因改良植物的品質；動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜產品品質、用轉基因動物生產藥物；基因治療：把正常的外源基因導入病人體內，使該基因表達產物發揮作用即可以解答此題．