Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細菌，其代謝產物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色。 測定水樣是否符合飲用水衛生標準，常用濾膜法測定大腸桿菌的數目。流程如圖所示：用濾膜過濾 待測水樣→水樣中的細菌留在濾膜上→將濾膜轉移到伊紅美藍的培養基（EMB培養基）上培養→統計菌落數目。

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進行滅菌處理的是_____。

（2）從培養基功能上劃分，EMB培養基屬于_____培養基，為檢測該培養基滅菌是否徹底，對于該培養基應采用的檢測方法是_____。

（3）為檢測嚴重污染水體中大腸桿菌數量，將水樣適當稀釋后，取樣涂布在上述平板培養基中，應選 擇顏色為_____的菌落進行計數。該方法是通過統計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數，其原理是_____。

（4）該同學進一步思考，利用濾膜法也可能用于測定待測水樣中其他微生物的數目。他取了兩份水樣，一份待測水樣來自變酸的果酒，從中檢測到兩種微生物，它們在結構上的主要區別是_____。 另一份來自湖泊，若要通過測量藍藻的數目來研究水華，則培養基配方中則必須添加_____（“水”、“無機鹽”、“碳源”、“氮源”）。

Answer 1

【答案】濾杯、濾膜和濾瓶 鑒別 將未接種的培養基在恒溫箱中培養一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生 黑色 當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的﹣個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌 有無細胞核 水、無機鹽、氮源

【解析】

濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養基上，經培養后計數和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數；該方法操作簡單、快速，主要適用于雜質較少的水樣。

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，這些實驗儀器都需要經過滅菌處理，與過濾有關的操作都要在酒精燈火焰旁進行，防止雜菌的污染。
（2）從功能上劃分，EMB培養基屬于鑒別培養基；培養大腸桿菌時，在接種前通常需要檢測培養基是否被污染，對于固體培養基應將未接種的培養基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養基上是否有菌落產生。
（3）根據題意可知，“大腸桿菌代謝產物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色”，因此為檢測嚴重污染水體中大腸桿菌數量，將水樣適當稀釋后，取樣涂布在上述平板培養基中，應選擇顏色為黑色的菌落進行計數。該方法是通過統計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數，其原理是當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。
（4）變酸的果酒中有兩種微生物，分別是酵母菌和醋酸菌，兩者分別屬于真核生物和原核生物，它們在結構上的主要區別是有無（成形的）細胞核；藍藻可以進行光合作用，屬于自養型微生物，因此其培養基中必須添加的成分有水、無機鹽、氮源。