Question

【題目】如圖表示科學家培養轉綠色熒光蛋白基因植物的過程,請回答:

(1)利用打孔器從煙草葉片上取多個大小相等的小圓片與重組農桿菌共培養一晝夜后,接種在含卡那霉素的培養基上,為篩選出被農桿菌感染的小圓片,作為運載體的Ti質粒應含有________基因,運載體上的_______________是RNA聚合酶識別和結合的位點.為了將目的基因整合到煙草細胞的_________________上,目的基因應插入Ti質粒的____________________片段上.

(2)圖中小圓片周圍長出的結構A稱為_______________,此后需要將生長良好的結構A轉移到分化培養基上.圖中④過程為______________________.本實驗可使用特殊的儀器在A中檢測目的基因的表達情況,請預測觀察到的現象是____________________________________________.

Answer 1

【答案】 卡那霉素抗性基因 啟動子 染色體（核DNA） T-DNA 愈傷組織 再分化 （愈傷組織邊緣或局部細胞）發出綠色熒光

【解析】分析題圖：圖示表示科學家培養轉綠色熒光蛋白基因植物的過程，①是利用打孔器從植物葉片上取多個大小相等的小圓片；②是將植物小圓片與重組農桿菌共同培養；③表示脫分化過程，其中A為愈傷組織；④表示再分化過程，B為胚狀體。

(1)作為運載體的Ti質粒應含有標記基因，即卡那霉素抗性基因，以便于篩選出被農桿菌感染的小圓片；運載體上的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點。農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA 可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。為了將目的基因整合到煙草細胞的染色體(核DNA)上，以上DNA片段都必須在Ti質粒的T-DNA片段上。

(2)由以上分析可知，圖中小圓片周圍長出的結構A為愈傷組織；結構B為胚狀體，圖中A→B的④過程中需要加入生長素和細胞分裂素，稱為再分化，再經⑤和⑥形成植株。用特殊的儀器在A中檢測目的基因的表達情況，若目的基因(綠色熒光蛋白基因)已經成功導入受體細胞并表達，應該會觀察到綠色熒光。