Question

【題目】【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】

下圖為綠色熒光小鼠制備流程圖，Gfp是綠色熒光蛋白基因，請分析回答：

（1）構(gòu)建表達載體需要的酶是：__________ ，表達載體包含綠色熒光蛋白基因Gfp、_______、___________、終止子和復(fù)制原點等；構(gòu)建表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中_______，并可遺傳給下代。

（2）提取Gfp基因時常用到PCR技術(shù)，PCR擴增目的基因時，首先要根據(jù)______合成引物；需要加入兩種引物，原因是_______，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴增。

Answer 1

【答案】 限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶 標記基因 啟動子 穩(wěn)定存在，表達和發(fā)揮作用 目的基因的核苷酸序列 DNA聚合酶只能從3＇端延伸DNA鏈

【解析】試題分析：本題考查基因工程，考查對基因工程工具、PCR擴增目基因、基因表達載體構(gòu)建的理解和識記。

（1）構(gòu)建表達載體需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割供體DNA和質(zhì)粒，并用DNA連接酶連接粘性末端，表達載體應(yīng)包含目的基因綠色熒光蛋白基因Gfp、標記基因、啟動子、終止子和復(fù)制原點等；構(gòu)建表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在、表達和發(fā)揮作用，并可遺傳給下代。

（2）PCR擴增目的基因時，首先要根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成引物；由于DNA聚合酶只能從3＇端延伸DNA鏈，因此需要加入兩種引物，才能確保DNA兩條鏈同時被擴增。