Question

蘇云金桿菌是一種對昆蟲有毒害作用的細(xì)菌,其殺蟲活性物質(zhì)主要是一類伴孢晶體蛋白。伴孢晶體蛋白經(jīng)昆蟲腸液消化成毒性肽,并因此導(dǎo)致昆蟲死亡。自從培育轉(zhuǎn)基因植物抗蟲棉成功后，研究人員又試圖將抗蟲基因?qū)�入水稻�?xì)胞中，從而培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻。研究人員從相關(guān)生物體內(nèi)提取出的部分物質(zhì)或結(jié)構(gòu)如下圖所示：圖1表示含有目的基因（抗蟲基因）的DWA片段長度(bp為堿基對）和部分堿基序列，圖2表示作為運(yùn)載體的一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp I,BamH I,Mbo I ，Sma I 4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們所識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)（用“↓”表示）分別為C ↓CGG；G ↓ GATCC；n↓ GATC；CCC ↓ GGG。請回答下列問題：

(1)若用限制酶Sma I完全切割圖1中所示DNA片段，則其產(chǎn)物有______種，長度分別為______。

(2)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是______。

(3 )在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的水稻細(xì)胞，需配置相應(yīng)培養(yǎng)基，其中添加的碳源是______，目的是提供營養(yǎng)和______。另外，培養(yǎng)基中除了含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，一般還需要添加______(抗生素A/抗生素B)，該培養(yǎng)基從用途上看屬于______培養(yǎng)基。

(4)在培養(yǎng)過程中，除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外，成功的另一個關(guān)鍵是操作過程必須保證無菌，鑷子等器械及培養(yǎng)基都可使用的滅菌方法是______。

 

Answer 1

【答案】

（1）3      537bp、790bp、661bp （2分）

（2）BamH I  （2分）

（3）蔗糖     調(diào)節(jié)滲透壓       抗生素B      選擇

（4）高壓蒸汽滅菌

【解析】

試題分析：根據(jù)題意和圖示分析可知：限制酶Sma I的酶切位點(diǎn)是CCC ↓ GGG，所以圖1中所示DNA片段能被切割成3段，長度分別為534+3=537；796-3-3=790；658+3=661。圖1中的目的基因序列為GGATCC，質(zhì)粒中也有GGATCC序列，所以應(yīng)選用的限制酶是BamH I。在植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中添加的碳源是蔗糖，它不僅能提供營養(yǎng)，還能調(diào)節(jié)滲透壓。由于抗生素A抗性基因被插入的目的基因破壞，所以在培養(yǎng)基中添加抗生素B，此培養(yǎng)基從用途上看屬于選擇培養(yǎng)基。在植物組織培養(yǎng)過程中，要用高壓蒸汽滅菌法對鑷子等器械及培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生理解轉(zhuǎn)基因植物的知識要點(diǎn)，要求能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)，通過比較、分析對問題進(jìn)行解釋、推理，得出正確的結(jié)論的能力及能從圖示中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息的能力。