Question

下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)。

下圖是轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題：

(1) 用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。

(2) 構(gòu)建含目的基因的重組質(zhì)粒A時(shí)，選 用 BamhHI 和HindⅢ酶對(duì)_______和 _______進(jìn)行切割，可以防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化。

(3) ①?⑤中存在堿基互補(bǔ)配對(duì)的是____________。

(4) 香蕉組織細(xì)胞具有__________，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入目的(抗病)基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中④、⑤依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的_________、____________。培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加_________和__________以誘導(dǎo)外植體完成④、⑤生理過程，培養(yǎng)成完整的植物體。在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞的新陳代謝類型是_____________。

(5) 如何檢測圖示過程最終是否取得成功？____________________________。

 

Answer 1

【答案】

（1）SmaI酶會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因（2）外源DNA和質(zhì)粒（3）①④⑤  （4）全能性 脫分化 再分化 生長素 細(xì)胞分裂素   異養(yǎng)需氧型（5）用蟲子感染轉(zhuǎn)基因香蕉，觀察是否抗蟲

【解析】

試題分析：

（1）質(zhì)粒抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，由圖可知，標(biāo)記基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位點(diǎn)，都可以被SmaI酶破環(huán)，故不能使用該酶剪切質(zhì)粒和含有目的基因的DNA。

(2) 構(gòu)建含目的基因的重組質(zhì)粒A時(shí)，選用 BamhHI 和HindⅢ酶對(duì)外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割，這樣使目的基因兩端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，同理，也可以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。

(3)— (4)圖中①是構(gòu)建基因表達(dá)載體，存在堿基互補(bǔ)配對(duì)；②③是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，不存在堿基互補(bǔ)配對(duì)；④和⑤表示植物組織培養(yǎng)，原理是香蕉組織細(xì)胞具有全能性，其中④表示脫分化，⑤表示再分化，這兩個(gè)過程都在進(jìn)行有絲分裂，所有都存在堿基互補(bǔ)配對(duì)；培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加生長素和細(xì)胞分裂素。在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞的新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。故①?⑤中存在堿基互補(bǔ)配對(duì)的是①④⑤。

(5)可以從個(gè)體水平鑒定圖示過程最終是否取得成功，其鑒定方法為：用蟲子感染轉(zhuǎn)基因香蕉，觀察是否抗蟲。

考點(diǎn)：本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。

點(diǎn)評(píng)：本題以抗病香蕉味素材，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的理解能力、識(shí)記能力和應(yīng)用能力。