Question

【題目】某同學欲從被污染的土壤中采用富集培養的方法篩選出能高效降解原油的細菌，經過的一般步驟是采集菌樣→富集培養→純種分離→性能測定，實驗過程如圖所示，請分析回答：

（1）下面兩組圖是采用純化微生物培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖解，請分析接種的具體方法。

圖A所示的接種方法是____________，圖B所示的接種方法是_____________。

（2）在篩選過程中，應將__________接種于以___________為唯一碳源的培養基上，從功能上講，該培養基屬于___________培養基。

（3）現有1L土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有9mL無菌水的試管中，依次稀釋l03倍．各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到圖A的三個培養基上培養，記錄的菌落數分別為55、56、57，則1L原土壤浸出樣液中菌體數為_________。

（4）為篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明帶區域的大小．一般透明帶區域越大說明該菌株降解原油的能力__________。

（5）配制培養基時各種成分在溶化后分裝前必須進行_________，接種前要進行 ____________，在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在___________條件下進行。

Answer 1

【答案】 稀釋涂布平板法 平板劃線法 土壤樣品稀釋液 原油 選擇 5.6×108 越強 pH調整 高壓蒸汽滅菌 無菌

【解析】試題分析：富集培養技術實際是一種選擇分離微生物的技術，其所用培養基為選擇培養基，本題是利用生物對特殊碳源的需求，配制特殊的培養基來進行生物的篩選，解答過程中要注意運用無菌操作的一些技術要求。

（1）據圖分析：圖A中菌落均勻分布，接種方法是稀釋涂布平板法，圖B的接種方法是平板劃線法。（2）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養基上，從功能上講，該培養培養基屬于選擇培養基。（3）每升原土壤浸出液樣中菌體數為：（55+56+57）÷3÷0.1×1000×103=5.6×108個。（4）一般情況下，透明帶區域越大說明該菌株的降解對羥基苯甲酸的能力越強。（5）配制培養基時各種成分在溶化后分裝前必須進行pH調整，接種前要進行高壓蒸汽滅菌，在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行。