Question

【題目】為探究培養液中酵母菌種群數量的動態變化，某研究性學習小組按下表完成了有關實驗。

試管編號	培養液/mL	無菌水/mL	酵母菌母液/mL	溫度（℃）
A	10	-	0.1	20
B	10	-	0.1	5
C	-	10	0.1	20

（1）該實驗探究的是_______________對酵母菌種群數量變化的影響。

（2）本實驗中，某學生的部分實驗操作過程如下：

①將A、B、C三支試管放置在表中相應的溫度、其它條件適宜的環境中培養，第一天開始取樣計數，連續七天； ②用無菌吸管從靜置試管中吸取酵母菌培養液少許；

③加入血細胞計數板計數室，再蓋上蓋玻片，并用濾紙吸去多余菌液。

請糾正該同學實驗操作中的兩個錯誤。①________________________；②________________________。

（3）若吸取酵母菌樣液1mL并稀釋100倍，采用血細胞計數板（規格為1mm x lmm x 0．lmm，由400個小格組成）計數，下圖表示一個中方格中酵母菌的分布情況，以該中方格為一個樣方，計數結果是酵母菌有________個。如果計數的中方格酵母菌平均數為18個，則1mL培養液中酵母菌的總數為____________個。

Answer 1

【答案】營養、溫度 取樣前振蕩試管 先蓋上蓋玻片，再加入血細胞計數板計數室 15 2．88×108

【解析】

酵母菌可以用液體培養基來培養，培養液中的酵母菌種群的增長情況與培養液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關，可以根據培養液中的酵母菌數量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數量的變化情況。利用血細胞計數板在顯微鏡下直接計數是一種常用的細胞計數法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數目，所以一般用于單細胞微生物數量的測定，由于血細胞計數板上的計數室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據在顯微鏡下觀察到的細胞數目來計算單位體積的細胞的總數目。

（1）根據題意和圖表分析可知：實驗自變量有培養液與無菌水、溫度有20℃和5℃，所以該實驗探究的是營養和溫度對酵母菌種群數量變化的影響。

（2）①培養過程中，酵母菌可能會沉在試管底部，如果取樣取的是試管底部，實驗數據則會偏大，如果取樣取的是試管上部，則實驗數據則會偏小，因此制片前要輕輕震蕩試管使酵母菌分布均勻。

②在制作臨時裝片，應先蓋上蓋玻片，然后沿著蓋玻片的邊緣滴一滴培養液，讓培養液慢慢自行滲入血細胞計數板計數室。

（3）估算培養液中酵母菌種群密度的常用方法稱為抽樣檢測法．酵母菌在計數時，計數原則為“計上不計下，計左不計右”，因此計數相鄰兩邊，計數結果是酵母菌有15個．如果計數的中方格酵母菌平均數為18個，則1mL培養液中酵母菌的總數=18÷25×400×104×100=2.88×108個。