Question

【題目】我們日常吃的大米中鐵含量極低，科研人員通過基因工程等技術，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉基因水稻，改良了稻米的營養品質．如圖為培育轉基因水稻過程示意圖，請分析回答．
（1）為了在短時間內獲得大量鐵結合蛋白基因，可以采用技術．與細胞內DNA復制時的解旋過程相比，該技術的DNA解鏈過程有何不同？（寫出一點即可）
（2）構建重組Ti質粒時，通常先要用分別切割含目的基因的DNA片段和質粒，以使目的基因能插入農桿菌Ti質粒的中．將重組Ti質粒導入農桿菌時，可以用處理農桿菌，使重組Ti質粒易于導入．然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的上．
（3）將含有重組Ti質粒的農桿菌與水稻愈傷組織共同培養時，通過培養基2的篩選培養，可以獲得；檢測培育轉基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉基因稻米 ．

Answer 1

【答案】
（1）PCR；不需要解旋酶
（2）（同種）限制酶； T﹣DNA； Ca2+（氯化鈣）；染色體DNA
（3）含有重組質粒的愈傷組織；鐵的含量
【解析】解：（1）PCR技術可在體外大量擴增目的基因，因此為了在短時間內獲得大量鐵結合蛋白基因，可以采用PCR技術．與細胞內DNA復制時的解旋過程相比，該技術的DNA解鏈過程不需要解旋酶，通過高溫變性達到解旋的目的．（2）農桿菌中的Ti質粒上的T﹣DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T﹣DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．構建重組Ti質粒的過程中，通常要用同一種限制酶分別切割Ti質粒和含目的基因的DNA片段，使以使目的基因能插入農桿菌Ti質粒的T﹣DNA中．將目的基因導入微生物細胞時常用用感受態轉化法，即用CaCl2溶液處理農桿菌使之成為感受態細胞，易于重組Ti質粒導入．然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體DNA上．（3）將含有重組Ti質粒的農桿菌與水稻愈傷組織共同培養時，通過培養基2的篩選培養，可以獲得含有重組質粒的愈傷組織．該基因工程的目的基因為鐵結合蛋白基因，因此檢測培育轉基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉基因水稻種子中鐵含量．

所以答案是：（1）PCR 不需要解旋酶（2）（同種）限制酶　 T﹣DNA　 Ca2+（氯化鈣）　 染色體DNA（3）含有重組質粒的愈傷組織　　鐵的含量

【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術即可以解答此題．